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细胞增殖是生物体生长、芨育、繁殖和遗传的基础,是生物体的重要生命特征。细胞增殖指细胞在周期调控因子的作用下,通过DNA复制、RNA转录和蛋白质合成等复杂反应后进行分裂来完成。
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概念和原理
细胞增殖是生物体生长、芨育、繁殖和遗传的基础,是生物体的重要生命特征。细胞增殖指细胞在周期调控因子的作用下,通过DNA复制、RNA转录和蛋白质合成等复杂反应后进行分裂来完成。目前常用的有MTT比色法和CCK8法:
● MTT(四甲基偶氮唑盐)比色法:细胞线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成蓝紫色的针状甲攒( Formazan)结晶并沉积在细胞中,结晶物能被二甲基亚砜(DMSO)溶解。使用酶标仪在490 nm波长处测量OD值,间接反映活细胞的数量及其活性,判断细胞毒性、细胞活性和细胞增殖能力。
● CCK8法:CCK8试剂盒采用MTT的升级产品,基于WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)在电子耦合剂存在的情况下,可被细胞线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色甲攒( Formazan)产物。颜色的深浅与细胞增殖能力成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450 nm波长处测量OD值,间接反映活细胞数量及活性。
科研和临床应用
细胞增殖检测常用于检测癌基因与抑癌基因的功能、检测信号转导分子功能、测定物质毒性、评估药物安全、检测细胞增殖能力等。
客户须知
客户可提烘相关的实验设计或处理完成的细胞。
对于悬浮细胞,客户可选择采用MTT法或CCK8法。