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均一化cDNA文库是克服基因转录水平上巨大差异给文库筛选和分析带来障碍的有效措施,有利于研究基因的表达和序列分析。
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均一化cDNA文库
均一化cDNA文库是克服基因转录水平上巨大差异给文库筛选和分析带来障碍的有效措施,有利于研究基因的表达和序列分析。我们基于双链特异性核酸酶(Duplex-Specific Nuclease, DSN)的先进cDNA文库均一化技术,能减低高丰度表达基因100倍以上,有效富集低丰度表达基因,从而降低冗余率。
文库特点:
1、材料用量少,只需1mg总RNA;
2、无需反复杂交过程,均一化程度高;
3、均一化后平均插入片断大小无明显变化;
4、均一化后,减低高丰度表达基因10-100倍。
均一化cDNA文库构建材料要求:
组织(100~200mg)、细胞(>106)或总RNA (>1mg ),请务必保持样品新鲜,RNA 无任何降解,植物材料应避免过老的组织,尽量用柔嫩部位,以确保文库质量。同时请尽量提供物种基因组背景资料信息,如:基因组大小,基因平均长度,预计表达的基因数量等等。
均一化cDNA文库构建提供结果:
1、产物电泳图谱及均一化前后管家基因对比图;
2、文库连接液,保存在-20℃;
3、文库评价数据,包括库容量,插入片段平均长度,重组效率, cDNA完整性评价等;
4、包含实验流程、材料、方法等在内的完整的实验报告。
均一化cDNA文库构建服务周期:得到合格的总RNA后30个工作日
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