哺乳动物细胞表达服务（SC1259）

详细信息请访问http://www.genscript.com.cn/protein_mammalian_cell_expression.html

在过去二十年中, 重组蛋白（r-蛋白），特别是用于结构-功能分析的已纯化蛋白，在生物制药学领域的应用日益广泛。由于应用于该领域的r-蛋白基本上均需要翻译后修饰，以获得与天然分子相同的生物活性，而哺乳动物细胞自身具备蛋白折叠和翻译后修饰的功能，因此很多客户选择哺乳动物细胞蛋白表达系统，表达高质量的r-蛋白。

如果在您的实验过程中，出现关键性蛋白折叠问题或E.coli在充裕的时间内仍无法表达蛋白，或表达的蛋白质量不高等问题时，您可以尝试金斯瑞哺乳动物蛋白表达服务。我们的蛋白表达专家能在四周内提供mg级的哺乳动物细胞表达的蛋白 ，帮助您快速获得满意的实验结果。

服务优势

• 能实现翻译后修饰及正确的蛋白折叠复性
• 稳定及瞬时蛋白表达
• 高效启动子(CMV, SV40)控制蛋白表达
• 表达水平高
• 大规模蛋白表达

服务内容

• 载体构建及改进
  • 不论是稳定或是瞬时表达，金斯瑞均可将客户的cDNA克隆至客户或金斯瑞提供的哺乳动物细胞表达载体中。如果客户需要，金斯瑞可在每个表达载体中添加分泌信号或标签，以促进亲和层析后蛋白的最终修复。对于更复杂的方案，如：需要翻译后特殊修饰，形成复杂多聚体，多肽内或多肽间形成二硫键，或特殊的糖基化，金斯瑞推荐定制相关载体。我们还可以帮助客户标记需要的基因、基因片段或与荧光标记相融合（如GFP）。另外，我们能生产并鉴定高效的稳定细胞系，适合客户扩大生产规模以及进行cGMP生产。
  
   
• 稳定基因表达符合长期生产需求
  • 整个实验操作流程，从转染，筛选和细胞分离，到评估初步克隆在无血清培养条件下的生产能力和适应性，提供长期稳定及规模可调的蛋白生产。
  • 根据客户的需求，金斯瑞将进行基因扩增，用于氨甲喋呤以及后续克隆及储存。我们也具备全面的遗传学研究能力，以及无论选择的介质是否存在的情况下生产的稳定性。金斯瑞提供细胞群储存服务，可用作prebanks预储备, masterbanks主要储备, and working cell banks以及工作元件储备。
  
   
• (TGE) 瞬时表达
  • 稳定基因表达是将重组基因插入寄主基因组中，但鉴定及检测重组细胞系是个耗时、昂贵的过程，因此一些客户，尤其是转包合同或需大规模制备最优化细胞系的客户选择快速制备r-蛋白，快速蛋白制备(能提供mg（毫克）级至g（克）级)通过使用哺乳动物细胞TGE满足这些客户的需求。与稳定基因表达相比，TGE主要用于短期内制备r-蛋白，一般在10天内即可快速转染，无需质粒DNA的遗传性选择。我们的瞬时表达使用悬浮细胞，能轻松表达毫升至100L的蛋白。适合的表达载体构建完成四周左右，我们就能交付给客户表达产物：细胞培养液收集物或重组蛋白。如果客户需要，金斯瑞能将客户的目的基因，克隆入专为TGE系统所设计的高效表达载体中。
  
   
• 工艺过程开发及扩大规模
  • 金斯瑞能优化表达过程以及表达的产物，并能对增长率,转种率, cell mass细胞群, 以及更改条件，促进特异化生成并测定生产体积等等方面进行全面的分析。金斯瑞同样能按比例降低生产规模，预测细胞表达量。金斯瑞自主研发的特异性、高生产效率的表达系统，是提供给客户高通量生产的最佳保障。
  • ¹⁵N- 或¹³C-标签蛋白表达。
  
   
• 纯化
  • 蛋白表达后，我们会富集培养液，收集上清或细胞，进行蛋白纯化。金斯瑞常用蛋白纯化方式为亲和柱纯化，同时也提供凝胶过滤、离子交换及疏水层析等纯化方法。初步纯化的蛋白经特殊蛋白酶去除纯化标签后，通过凝胶过滤进一步进行纯化。
  • ¹⁵N- 或¹³C-标签蛋白表达。
  
   
• 蛋白鉴定
  • 每个订单完成后，我们的专家将确认金斯瑞交付的产品确实满足客户的需求。一般来说，金斯瑞会选取以下几个或全部检测方法鉴定表达的蛋白：染色后进行SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）或Native-PAGE(未变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)检测，蛋白浓度测定，Western blotting检测，吸收光谱检测，N末端序列测定，质谱分析，核磁共振波谱分析，以及活性检测，亲和层析，离子交换层析，凝胶过滤层析，疏水层析等方法纯化蛋白。

服务特点

金斯瑞是您可靠的基因、多肽、蛋白和抗体研究伙伴，帮助进行基础生命科学研究，生物药研究以及早期药物开发。自2002年成立以来，金斯瑞发展迅速，已成为全球领先的生物技术公司，公司总部位于美国新泽西州，在欧洲、日本和中国均设立了分公司。金斯瑞一直致力于为全世界的科研机构提供最好的研究服务，已经为全世界100多个国家的科学家提供了生命科学研究产品和服务。我们已经建立了最佳通量和质量的生物学研究服务，包括基因合成，分子生物学服务，多肽合成，定制抗体，蛋白表达，抗体及蛋白质工程以及体外和体内药效学研究，所有的目标都是希望让科研变得更加简单。

金斯瑞始终以"提供最好的质量给客户，为客户的利益服务"为理念。基于这个理念，我们的管理体系经过了ISO9001:2008认证，提供的产品达到cGMP水平，同时通过了AAALAC及OLAW认证，努力为客户提供最好的服务。同时，为不同的客户提供不同的商业合作模式，包括项目模式，定向全时制模式，战略合作联盟模式。

金斯瑞特色

同行评议引用高——金斯瑞是被引用频率很高的生物科技公司。超过12000篇杂志引用金斯瑞的服务和产品

基因合成——全球领先的基因合成供应商，月碱基通量超过1亿bp，最长合成基因达50 kb，交付周期短至4个工作日

多肽合成——6000条/月，合成长度达200 aa

抗体服务——6000只兔，12000只鼠，最快45天生产多/单克隆抗体，保证免疫反应和交付量

蛋白表达——4个主要的表达系统（原核，酵母，昆虫，哺乳动物细胞），保证纯化后的蛋白

生物工程服务——瞬时表达，稳定细胞系建立，工艺研发和放大，物化性质鉴定

体外药效学服务——400多种GPCR筛选模型，ADCC & CDC生物大分子体外活性评价，PD-1/PD-L1/CTLA-4抗体药物筛选服务

动物模型服务——4个关键的体内药效学服务：体内药物有效性评价，药代动力学研究，毒性评价，生物标志物和生物分析服务

抗体及蛋白质工程服务——单抗测序，抗体人源化，亲和力成熟，骆驼单域抗体药物研发，一站式抗体药物研发服务平台

• 产品客服电话：400-025-8686-5810，400-025-8686-5256
• 基因合成/分子生物学服务电话：400-025-8686-5820
• 多肽/抗体服务电话：400-025-8686-5811
• 蛋白/生物工程/细胞系构建/生物药研发服务电话：400-025-8686-5821
• 模式动物/抗体药物研发/新药筛选服务电话：400-025-8686-5809
• 引物合成服务电话：400-025-8686-5812
• 测序服务电话：400-025-8686-5813