蛋白表达、纯化

随着人类基因组计划的完成，蛋白表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。越来越多的基因被发现，其中多数基因功能不明，利用蛋白表达系统表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。根据不同的表达要求，如表达量高低、目标蛋白的活性和表达产物的纯化方法，可选用适当的表达系统及相应的表达策略。
1. 哺乳动物细胞表达
    便于你在下游应用中获得更好的实验结果，你需要得到有正确折叠和翻译后修饰的哺乳动物表达的蛋白。FreeStyl表达服务可以快速为你提供大量的哺乳动物表达的重组功能蛋白。该系统采用专门设计的化学成分限定的无血清培养基，是完整的悬浮细胞培养系统；适合于针对悬浮CHO和293细胞进行质粒瞬时转染。
（1）服务流程
1)将你的目的基因克隆入一个哺乳动物表达载体中
2)为目的蛋白的表达进行时间点实验以确定最佳表达时间
3)表达上清的浓缩
4)采用SDS-PAGE或Western分析鉴定目的蛋白的表达
5)特定的蛋白活性分析
6)优化表达条件并进行放大
7)纯化
（2）您需要提供
高纯度的哺乳动物表达载体以及基因信息和表达要求
（3）我们提供
纯化的蛋白，或瞬时表达上清/细胞沉淀样品
（4）质量保证
快速得到有正确折叠和翻译后修饰的哺乳动物表达的蛋白

2. 原核表达
    将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。原核蛋白表达系统是迄今为止最为成熟可靠的蛋白表达系统，能快速表达纯化各种不同来源蛋白。所制备的重组蛋白可用于药物筛选、结构生物学研究、细胞生物学研究、蛋白质组学研究等的一系列生物医学领域的研究。
（1）服务流程
1)表达质粒的构建
2)质粒转化及高表达菌株筛选
3)转化菌摇瓶培养，诱导表达
4)目标蛋白纯化
5)SDS-PAGE 检测表达及纯化情况
（2）您需要提供
1)提供已克隆在原核表达载体／克隆载体上的质粒或菌株；
2)提供相关资料及核酸／蛋白序列，由我们利用生物信息学的方法进行分析处理后提出具体可行的实验方案
（3）我们提供
1)初步的培养条件和合理的纯化工艺；纯化后的蛋白；
2)SDS-PAGE蛋白电泳结果和详细的实验记录。
3)产品报告（含相关数据、SDS-PAGE及质粒测序结果等）
（4）质量保证
1)根据特定系统和用途决定相应的实验方案
2)表达和检测时，设置对照组