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支原体检测服务
利用qPCR(TaqMan探针法)检测支原体DNA,反应体系中同时存在标记两种颜色TaqMan探针及相关引物,分别检测支原体DNA和内模板。
服务类别:分子与细胞总访问:159
最后更新:2023-6-27半年访问:6
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支原体污染的危害
支原体是实验室中常见的污染细胞的原核生物,据统计约有15%-35%的细胞被支原体污染。支原体会改变宿主细胞的结构和功能等一系列特征,造成实验结果不准确;干扰细胞代谢和生长,改变核酸合成,影响细胞抗原性,导致染色体改变,干扰病毒复制以及模仿病毒的作用。因此,每一株外来细胞在进入实验室之前,都应进行支原体检测,并且应对培养中的细胞定期(如每2-3个月)进行支原体检测服务
建立定期的监控方案,有助于提高科研效率,在污染发生早期及时处理,可避免支原体污染造成更大损失!
原理
利用qPCR(TaqMan探针法)检测支原体DNA,反应体系中同时存在标记两种颜色TaqMan探针及相关引物,分别检测支原体DNA和内模板。
支原体检测优势
1、灵敏度:qPCR法最低的稳定检测至10拷贝的支原体DNA。
2、稳定:qPCR法全程闭管操作,无产物交叉污染。
3、可靠:通过内参扩增效率的检测,可有效检测试剂盒质量,样本中各类PCR抑制剂的影响,避免假阴性。
4、方便:操作简单,无需后期跑电泳步骤。
5、定量:通过CT值判断,可进行定量检测。结果可分为:阴性、弱阳性、阳性、强阳性,给科研人员提供更多的有用信息。
结果判断

PCR模板 支原体(FAM)CT值 判定说明
阳性对照 26±3 阳性成立
>30 阳性不成立
阴性对照 >34 阴性成立
<34 阴性不成立
待测样品
(内参CT值<30)
>34 阴性
30-33 灰区,需验证
25-29 弱阳性
19-24 阳性
<19 强阳性
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