荧光定量PCR(Real-time PCR),是指在 PCR 扩增反应体系中加入荧光基团,通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
佳维斯分子蛋白实验平台可提供细胞培养,核酸,蛋白提取、纯化、鉴定、互作以及生理生化检测等常规检测:QPCR、WB、ELISA、质谱、载体构建、质粒抽提、原位杂交、免疫共沉淀、细胞流式等,为研究人员提供生物学领域的全方位技术服务。
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以探针法荧光定量 PCR 为例:PCR 扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。开始时,探针完整地结合在 DNA 任意一条单链上,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,检测不到荧光信号;PCR 扩增时,Taq 酶将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条 DNA 链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与 PCR 产物形成完全同步。
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