上海逍鹏生物提供外泌体蛋白质组学服务,无需昂贵的同位素标记试剂,实验周期短;可用于不同物种间的“有无差异蛋白”比较;克服标记定量技术在样本数量的上限制,灵活方便。
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TMT标记定量蛋白组学 | ||||||||
TMT (Tandem mass tag)是由ThermoFisher Scientific公司研发的一种多肽体外等重同位素标记的相对与绝对定量技术,采用6、10及16种同位素的标签,通过特异性标记多肽的氨基基团,经高分辨质谱仪串联分析,可同时比较多达16种样品之间的蛋白质表达量,是定量蛋白质组学中经典的高通量筛选技术。 |
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实验流程 | ||||||||
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数据分析 | ||||||||
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技术优势 | ||||||||
同一批次标记的样本统一处理,减少样本处理及实验误差,实验平行性较高 同一批次标记定量稳定性高 通过分级方法可深度可大大增加蛋白鉴定深度 |
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DIA蛋白质组学 | ||||||||
DIA(data-independent acquisition,数据非依赖性采集)技术是近年来发展起来的一种新的质谱技术,属于非标记蛋白质组学方法。采用数据非依赖性扫描模式:将质谱整个全扫描范围分为若干个窗口,然后对每个窗口中的所有离子进行检测、碎裂,从而无遗漏、无差异地获得样本中所有离子的信息。从而降低样本检测的缺失值,同时提高定量准确性和重复性,实现大样本队列中高稳定,高精准的蛋白质组定量分析。 与DDA技术相比,DIA技术的优势包括: (1)采集所有的离子信息,实现更高的数据覆盖度; (2)减少采集的随机性,实现极高的检测重现性、稳定性; (3)采用碎片离子定量,定量精密度、准确性、线性范围大大提高。基于上述技术优势,DIA技术尤其适用于大规模样本的高度覆盖、稳定和可追溯地分析。 |
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实验流程 | ||||||||
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数据分析 | ||||||||
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技术优势 | ||||||||
全扫描模式:数据非依赖性采集模式,大大减少高丰度干扰,全面采集高低丰度信号,数据覆盖度提高近40% 超高重现性、稳定性:大样本鉴定重复率提升近40%,定量精密度提升近1倍 超高定量准确度:定量能力接近金标准SRM/MRM靶向技术 |
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Label free 蛋白质组 | ||||||||
Label free是一种不依赖于同位素标记的非标记蛋白组定量技术,通过液质联用技术对蛋白质酶解肽段进行质谱分析,无需使用昂贵的稳定同位素标签做内标,只需分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据,比较不同样品中相应肽段的信号强度,从而对肽段对应的蛋白质进行相对定量。 | ||||||||
实验流程 | ||||||||
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数据分析 | ||||||||
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技术优势 | ||||||||
无需昂贵的同位素标记试剂,实验周期短 可用于不同物种间的“有无差异蛋白”比较 克服标记定量技术在样本数量的上限制,灵活方便 |
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TMT、Label Free、DIA如何选择 | ||||||||
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保密承诺 | ||||||||
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