慢病毒包装系统介绍
(1)慢病毒载体,含有外源基因片段、外源基因的启动子,以及其它病毒包装、整合所需的顺式作用元件;
(2)包装质粒:含有病毒包装所必需的反式作用元件;通常由2-3个质粒组成,含有3个组要结构蛋白,gag:编码病毒的主要结构蛋白;pol:编码病毒蛋白水解酶、逆转录酶和整合酶;env(VSV-G) :编码病毒包膜蛋白
(3)表达慢病毒用的包装细胞:通常是用293T 细胞株,能够在慢病毒载体和包装质粒共转染后产出慢病毒。
慢病毒的优势
(1)宿主范围广,可以感染分裂或者非分裂的细胞,也可以感染质粒较难感染的细胞;
(2)具有整合性,可携带外源基因整合到宿主中,在靶细胞中得到持续高效稳定的表达
(3)包装容量大,可以携带大约5kb的外源片段
(4)滴度高,通常滴度可以达到10
8~10
10 TU/mL。
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