类器官基因操纵策略

技术领域
类器官基因操纵
技术要点
通过病毒载体在类器官中实现高效基因操纵，包括过表达、敲低、敲除以及稳定单克隆筛选
技术内容
首先将目的基因克隆至病毒核心载体，经过与辅助质粒共转染细胞包装成病毒后，再与类器官进行平面化共孵育12小时后，恢复3D培养，实现高通量类器官模型基因操纵。
技术先进性
1）高效：通过优化的AAV病毒可实现高达80%以上的瞬时表达效率；通过慢病毒感染和筛选，可达到100%表达效率；
2）便捷：病毒包装完成后，可在10分钟内实现类器官基因操纵，24小时内观察基因表达；

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腺相关病毒载体（AAV-DJ）实现人源肝脏类器官中基因操纵和功能检测
 
  Journal of Biological Chemistry, 2019, IF=5.2
 

使用类器官进行特定基因功能研究，细胞谱系转变的基因研究、特定基因功能解析、类器官发育信号机制。
 
相关领域关键词：
细胞谱系转变、基因功能研究、发育信号、基因筛选、谱系追踪、病毒感染
 
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