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综合检测平台-----细胞流式检测
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒(如微球,细菌等)逐个进行快速定量分析和分选的技术。
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最后更新:2021-5-25半年访问:10
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流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒(如微球,细菌等)逐个进行快速定量分析和分选的技术。其主要特点是:1.测量速度快;2.可进行多参数测量;3.是一门综合性的高科技方法;4.既是细胞分析技术,又是精确的分选技术。经过长时间的发展,流式细胞术已经十分成熟,并被广泛的运用于从基础研究到临床实践的各个方面,涵盖了细胞生物学、免疫学、血液学、肿瘤学、药理学、遗传学及临床检验等领域,在各学科中发挥着重要的作用。
待测样品(如细胞、染色体、精子或细菌等)经荧光染料染色后制成样品悬液,在一定压力下通过鞘液包围的进样管而进入流动室,排成单列的细胞,由流动室的喷嘴喷出而成为细胞液流,依次通过检测区域。流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下,产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测,这种信号反映了细胞体积的大小;荧光信号的接受方向与激光束垂直,经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,形成多个不同波长的荧光信号。这些荧光信号会转化为可被计算机识别的数字信号,在计算机屏幕上显示出来。
实验流程:
1. 细胞培养。
2. 消化贴壁细胞并离心收集。
3. 重悬细胞,染色。
4. 流式细胞仪检测。
5. 统计结果分析。
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