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分子蛋白实验平台-----免疫印迹(WB)技术服务
WB基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
服务类别:分子与细胞总访问:361
最后更新:2021-5-25半年访问:17
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       WB蛋白质印迹(Western Blot),其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
一、样本制备                           
1. 悬浮细胞:取大约 1×107个细胞,低速离心收集,弃去培养液,加入1ml PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入-70℃ 冰箱保存。
2. 贴壁细胞:取大约1×107个贴壁细胞,胰酶消化后加入PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入-70℃ 冰箱保存。
3. 组织:采集新鲜组织(注意:生物体死亡后10分钟内取材料并保存好),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,切为小块,放入-70℃冰箱中保存。
样本量:组织样本,质量大于100mg;细胞样本,细胞数大于1×106;
二、蛋白质抽提                 

      实验对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂),匀浆后抽提总蛋白(或核蛋白)。 实验对象为细胞样品(细胞培养),每份样品取1×106~1×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂)抽提总蛋白(或核蛋白)。

三、收费标准                     
1.每张膜上做一种目的蛋白和相应的内参蛋白。每张膜上可以做8个样品。一抗另计,其他试剂免费;时间约2-3周。3张膜1200元/张,3张膜以上1000元/张,5张膜以上800元/张,10张膜以上价格另议。
2.总蛋白提取、定量、质控:80元/样
3.考马斯亮蓝染色:800元/膜(可做八个样)元
4.明胶酶谱:正式实验1000元/膜(最多可做九个样品)元
四、服务时限         
收到样本和一抗之日起15-25个工作日提交实验结果。

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