WB基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
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WB蛋白质印迹(Western Blot),其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
一、样本制备
1. 悬浮细胞:取大约 1×107个细胞,低速离心收集,弃去培养液,加入1ml PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入-70℃ 冰箱保存。
2. 贴壁细胞:取大约1×107个贴壁细胞,胰酶消化后加入PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入-70℃ 冰箱保存。
3. 组织:采集新鲜组织(注意:生物体死亡后10分钟内取材料并保存好),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,切为小块,放入-70℃冰箱中保存。
样本量:组织样本,质量大于100mg;细胞样本,细胞数大于1×106;
二、蛋白质抽提
三、收费标准
1.每张膜上做一种目的蛋白和相应的内参蛋白。每张膜上可以做8个样品。一抗另计,其他试剂免费;时间约2-3周。3张膜1200元/张,3张膜以上1000元/张,5张膜以上800元/张,10张膜以上价格另议。
2.总蛋白提取、定量、质控:80元/样
3.考马斯亮蓝染色:800元/膜(可做八个样)元
4.明胶酶谱:正式实验1000元/膜(最多可做九个样品)元
四、服务时限
收到样本和一抗之日起15-25个工作日提交实验结果。