细胞增殖活力检测

CCK-8实验原理：

全称为Cell Counting Kit-8，在电子载体1-Methoxy PMS存在的情况下能够被细胞内脱氢酶还原成水溶性的甲臜染料，生成的(橙黄色)甲臜量与活细胞数量成正比，即颜色的深浅与细胞的增殖成正比。因此可以用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

实验一：细胞活性检测

1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(37℃,5% CO2)。

2、向每孔加入10 μL CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数)。

3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

5、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。

实验二：细胞增殖-毒性检测

1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃，5% CO2)。

2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。

3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如：6、12、24或48小时)。

4、向每孔加入10μL CCK溶液(注意不要再孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数)。

5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

7、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。

服务流程

1.制备细胞悬液：细胞计数

2.接种到96孔板中，同样的样本可做3个重复。

3.37℃培养箱中培养。

4.加入10ul CCK8

5.培养1-4小时

6.测定450nm吸光度

我们的优势：

1.专业技术人员具有数十年流式实验经验，可提供专业技术建议;

2.丰富的科研项目开发经验，可针对不同项目需求提供高质量的定制服务;

3.专业为您设计实验方案、项目实施、出具报告并解读。

青岛菲优特检测有限公司，于2016年受青岛市科技局与青岛蓝色生物科技园发展有限责任公司委托成立,共同合作运营青岛市生物技术药物公共研发平台，是一家专业提供生态环境、农业、食品、化工、生物领域、微生物、生物制药等领域的创新型技术服务公司，公司拥有CMA资质认证，旨在助力青岛室内各类生物医药企业、高校及科研机构创新发展的同时，面向全社会提供科学、独立、诚信、高效的研发专业技术服务。

青岛菲优特检测有限公司拥有中国合格评定国家认可委员会(CANS)认可实验室3000余平米，设有分析理化分析室、分子生物学室、细胞室等十多个专业实验功能间。配备液相色谱质谱联用仪(LC-MS)、气相色谱质谱联用仪(GC-MS)、电感耦合等离子体发射质谱仪(ICP-MS)、生物分子相互作用仪等250余台(套)、设备资产2700多万元高端理化和生化检测分析仪器和设备。菲优特检测现有硕士以上学历专职技术人员30余名，专业涵盖生物学、遗传学、药物化学、分析化学及水产学等相关专业，并且配备各个领域技术专家进行技术指导与支撑。

青岛菲优特检测有限公司以科学研究为首任，以客户为中心，在严格的程序下开展检测工作，为客户提供专业科学的检验检测、研发分析服务。