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外泌体浓缩、电镜等鉴定服务
研究发现,外泌体广泛参与细胞间物质运输与信息传递,调控细胞生理活动。外泌体内含有与细胞来源相关的蛋白质和核酸,能够通过生物屏障,在细胞间传递功能性核酸分子,从而发挥各种生物学功能。
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最后更新:2020-3-18半年访问:6
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外泌体浓缩、电镜等鉴定服务
 
外泌体是细胞外囊泡的一种,直径在30-150nm。外泌体广泛存在于各种体液中,包括血液、精液、唾液、尿液和母乳等。

研究发现,外泌体广泛参与细胞间物质运输与信息传递,调控细胞生理活动。外泌体内含有与细胞来源相关的蛋白质和核酸,能够通过生物屏障,在细胞间传递功能性核酸分子,从而发挥各种生物学功能。

外泌体的分离:外泌体存在于人类及动物的各种体液中,我们可以根据需要选择不同来源的样品相关的外泌体研究。不同的体液收集及保存标准各不相同。另外,根据后续需要开展的项目不同,各种体液需要的样品量也各不相同。例如:细胞培养上清在收集样品前,需要换成无外泌体血清培养。血浆样本采集时一定不能用肝素抗凝管。而尿液收集时,为了避免细菌污染,需要加入抑菌剂。分离出高纯度的外泌体是开展后续实验研究的关键。目前差速超速离心法是外泌体分离方法中的“金标准”,是首选的方法。
 
外泌体的鉴定:由于外泌体的特殊性,在外泌体分离后,需要进行形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、NTA(粒径及浓度鉴定)、WB(分子标志物)。
 
外泌体蛋白质组学分析及高通量检测:研究表明,外泌体内含有不同细胞来源的蛋白质及核酸。不同细胞来源的外泌体所携带的蛋白质和核酸也各不相同。外泌体携带的物质主要包含:各种蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA。这些蛋白质和核酸跟随外泌体进入受体细胞,在细胞通讯中发挥重要作用。不同细胞来源的外泌体所含有的蛋白成分和RNA可作为多种疾病的早期诊断标记物,也能作为靶向药物的载体进行疾病治疗。具体方法包含:miRNA测序、全外泌体组RNA测序、蛋白质组分析(iTRAQ、TMT、Label-free)等。
 
外泌体的标记或示踪分析:对分离的外泌体进行体外标记或活体示踪,可对外泌体的功能进行进一步的研究。细胞和外泌体共孵育培养时,细胞可通过胞吞过程吞噬外泌体,外泌体包裹的蛋白质、核酸等分子会释放出来,从而影响细胞的功能变化。将标记的外泌体加入受体细胞培养基中,与受体细胞进行共培养,观察细胞的功能变化,如细胞增殖、迁移与侵袭、细胞凋亡等;或者将外泌体注射入动物模型中,观察动物表型变化和检测动物相关指标。实验内容包括:外泌体标记、外泌体细胞功能检测、外泌体动物模型验证等。
 
迈斯普生物立足于武汉,为大家提供以下外泌体相关技术服务:
1、外泌体提取和纯化(超速离心法和试剂盒法)
2、外泌体浓度测定(NTA和纳米流式法)
3、透射电镜(形态鉴定)
4、WB(分子标志物)
5、外泌体荧光标记(PKH67/PKH26染色)
6、外泌体-细胞共孵育培养实验
7、细胞功能学检测(周期、凋亡、克隆形成、侵袭、转移等)
8、细胞基因表达检测(qPCR、Western blot、Elisa检测等)
9、高通量建库及全外泌体组RNA测序及数据分析
10、蛋白质组检测(iTRAQ、TMT、Label-free)及数据分析
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