科研服务

本平台提供的技术服务包括：SNP位点检测，菌种鉴定，载体构建，病毒包装，RNA和蛋白水平的基因表达检测：包括Q-PCR、Western Blot、ELISA，RNAassay，蛋白组学，表达谱和转录组测序等，蛋白定位检测：包括免疫荧光、免疫组化检测，蛋白相互作用包括co-IP、免疫荧光共定位检测等。本科研平台还可完成各项流式分析检测，基因敲除，基因过表达细胞株构建以及动物建模等实验。

我们以超前的市场观念，高效完美的服务，实惠的价格，一流的质量给广大的科研工作者提供各种技术服务。

protocol

细胞迁移和侵袭

划线法（迁移）：

用maker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀的划线，大约每隔0.5-1cm一道划线，在孔中铺入细胞，摇匀后过夜培养，细胞量以第二天融合率达到90%左右。第二天用10ul枪头比着直尺垂直之前的横线划线，用PBS清洗悬浮的细胞，然后换成新鲜培养基，培养0h，4h,8h,12h后分别在相同的放大倍数下拍照。用imageJ进行迁移分析。

Transwall法（迁移）

向transwell下室和上室中加PBS水化1h；消化细胞后用无血清培养基清洗细胞2次，用无血清培养基重悬细胞 ；吸出transwell上室和下室中的PBS，向下室加入500ul含FBS的完全培养基，上室加入200ul细胞悬液（细胞数量约为3000-5000个），排除上室底面的气泡；37℃培养箱中孵育24h，取出transwell，用4%多聚甲醛固定细胞，进行ＨＥ或结晶紫染色，用棉球擦去上表面的细胞，在显微镜下记数下表面的细胞。

Transwell法（侵袭）

基质胶准备：将冻存于-80冰箱的BD matrigel 在4℃过夜，变成液态。用预冷的无血清培养基按1:5稀释matrigel，混匀。按每个Transwell上室加入100ul稀释的matrigel；放入37℃培养箱中孵育4h；接种细胞前在下室中加入500ul完全培养基；消化细胞后用无血清培养基清洗2次，用无血清培养基重悬细胞 ；向上室加入200ul细胞悬液（细胞数量约为3000-5000个），排除上室底面的气泡；37℃培养箱中孵育24h，取出transwell，用4%多聚甲醛固定细胞，进行ＨＥ或结晶紫染色，用棉球擦去上表面的细胞和matrigel胶，在显微镜下记数下表面的细胞。

移植瘤模型：

实验动物: 成年（4周龄）裸鼠或SCID鼠。

注射细胞量：每只鼠注射10^6-10^7细胞量，溶于100-200ul完全培养基。

注射方式：腋窝下皮下注射。

受试药物注射方式：腹腔注射或瘤体注射。瘤体大小达到100mm²左右开始给药注射，每周注射2次

瘤体测量：长径和短径测量

瘤体解剖，HE染色，免疫组化染色