外泌体透射电镜检测

一、技术简介

外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200 nm，形态也呈现出多样性，有研究分为9个类别依次为：单囊泡、双囊泡、  多膜泡、小双层膜泡、椭圆膜泡、小管、大管、不完整的膜泡、不规则膜泡，其中在不同类别的囊泡中可以发现三个附加特征：表面具涂层的膜泡、内含纤维的膜泡、电子致密囊泡。

本司采取通过透射电镜确定外泌体大小。

二、实验流程

1. 外泌体戊二醛固定。

2. 清洗：用1mL PBS清洗3次，每次静置15min。

3. 锇酸固定：加入0.5 mL 2%锇酸溶液 4度固定2h。

4. 清洗：用1mL PBS清洗3次，每次静置15 min。

5. 脱水：用50%、70%、80%、90%乙醇各1mL梯度脱水分别静置15min，再用1mL 100%乙醇脱水2次，每次20min。

6. 置换：用1mL丙酮置换2次，每次静置15min。

7. 浸渍。

8. 包埋：将样品放入盛有纯包埋剂的包埋板中。

9. 聚合：将包埋板置于65℃条件下聚合48h。

10. 染色：醋酸双氧铀染色 10min后清洗；醋酸铅染色 10min后清洗。

11. 上机检测。

12. 提供实验报告。

三、服务说明及结果

1. 客户提供：外泌体（30 μl）或由我司分离得到外泌体。

2. 公司提供：基本实验步骤、图片、数据分析结果。

3. 实验周期：10个工作日。

研载生物科技（上海）有限公司（简称“研载生物”）是一家医学科研服务公司。