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目的基因不能直接整合到大多数真核细胞,常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞,从而得到表达满足实验需求。常用的有慢病毒、腺病毒、腺相关病毒和逆转录病毒。
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腺病毒表达系统 | 慢病毒表达系统 | 逆转录病毒 | |
病毒基因 | 双链DNA | 单链RNA | 单链RNA |
基因整合功能 | 病毒基因组不能整合到宿主基因组,瞬时表达外源基因 | 病毒基因组整合于宿主基因组,长时间、稳定表达外源基因 | 病毒基因组不能整合到宿主基因组 |
表达丰度 | 高 | 中 | 中 |
表达时间 | 快(1-2天) | 慢(2-4天) | 快(1-2天) |
感染细胞类型 | 分裂和不分裂细胞 | 分裂和不分裂细胞。适用于难转染细胞 | 感染分裂细胞,但在干细胞中表达效率低 |
毒性作用 | 细胞毒性 | 遗传毒性 | 遗传毒性 |
免疫原性 | 高免疫原性 | 低免疫原性 | 低免疫原性 |
动物模型 | 不能得到转基因动物 | 可产生转基因动物,效率较高 | 可以,效率很低 |
RNAi | 病毒进入细胞往往引起细胞内干扰素反应,不适合做RNAi实验 | 适合,是RNAi实验的优选工具 | 可以用作RNAi实验 |
基因过表达 | 包装容量较大。可以满足较大基因的包装,是过表达基因的优选工具 | 包装容量有限,过表达的基因过大时,病毒滴度受到影响 | 包装容量有限,过表达的基因过大时,病毒滴度受到影响 |
常见应用 |
1、体外细胞基因转导 2、基因治疗 |
1、体外细胞基因转导2、基因治疗 |
1、体外细胞基因转导 2、全基因组插入失活突变筛选 3、功能基因库构建 |
病毒载体作为一种重要的基因导入介质,其优势在于:
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