基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶的催化下加上荧光素标记的dUTP,可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测。详情咨询:18017844061
|
||||||||||||||||||
[发表评论] [本类其他服务] [本类其他服务商] |
服务商: 基尔顿生物科技(上海)有限公司 | 查看该公司所有服务 >> |
TUNEL检测:
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。
TUNEL检测(石蜡切片) |
取下适当的新鲜的组织块固定于4%-10%浓度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛与组织块体积比在10:1和20:1之间,4摄氏度保存运输; |
TUNEL检测(冰冻切片) |
取下的新鲜组织应立即放入超低温冰箱或者液氮中,用干冰运输,固定好的切片应于-80或者-20度保存,并尽快用于检测; |
TUNEL检测(细胞爬片) |
细胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,换PBS缓冲液4度保存运输,尽快用于检测; |
荧光法需要先拍一张凋亡荧光图,再拍一张原位染核图,再合并图层,最终我们提供的为三张荧光图片。
目前,基尔顿生物主营实验技术服务,如想了解TUNEL检测的更多内容,欢迎来电咨询!