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Tunel检测实验

Tunel检测实验


TUNEL detection experiment
基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶的催化下加上荧光素标记的dUTP,可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测。详情咨询:18017844061
服务类别:分子与细胞总访问:791
最后更新:2017-11-3半年访问:11
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TUNEL检测

细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。

TUNEL检测(石蜡切片)

取下适当的新鲜的组织块固定于4%-10%浓度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛与组织块体积比在10:1和20:1之间,4摄氏度保存运输;

TUNEL检测(冰冻切片)

取下的新鲜组织应立即放入超低温冰箱或者液氮中,用干冰运输,固定好的切片应于-80或者-20度保存,并尽快用于检测;

TUNEL检测(细胞爬片)

细胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,换PBS缓冲液4度保存运输,尽快用于检测;

 

荧光法需要先拍一张凋亡荧光图,再拍一张原位染核图,再合并图层,最终我们提供的为三张荧光图片。

目前,基尔顿生物主营实验技术服务,如想了解TUNEL检测的更多内容,欢迎来电咨询!

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