原位杂交（In Situ Hybridization）

实验介绍

原位杂交包括DNA及RNA原位杂交，通过将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，而实现对DNA或RNA的定位。基本原理为在细胞或组织结构保持不变的条件下，用标记的已知探针片段，按核酸杂交中碱基配对原则，与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合（杂交），所形成的杂交体 (Hybrids）经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的DNA或RNA分子。

荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization，FISH）因其所用探针被荧光物质标记（间接或直接）而得名，基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火温度下复性，通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象（即维持其原位）的前提下对靶核酸进行分析。

根据所用探针和靶核酸的不同，原位杂交可分为DNA-DNA杂交，DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类，可以在细胞标本或组织标本上进行。该方法的优点在于1） 能够用于那些细胞数量少且散在于其他组织中的细胞内DNA或RNA的研究； 2）操作不需要从组织中提取核酸，对于组织中含量极低的靶序列有极高的敏感性，并可完整地保持组织与细胞的形态，更能准确直接地反映出组织细胞的相互关系及功能状态。

服务流程

客户提供

●   细胞标本：新鲜固定的细胞爬/涂片，或培养细胞

●   组织/组织切片：新鲜组织（应在30min内实现固定）；液氮保存样本；石蜡切片或冰冻切片

●   靶基因序列号

●   相关参考文献

服务优势

●   专业化的细胞爬/涂片、切片制备技艺

●   标准化的原位杂交操作流程

●   先进的荧光显微拍摄系统

●   真实清晰完整的报告呈现

北京健坤禾润科技有限公司（以下简称“健坤禾润”）成立于2011年4月，是一家提供专业医学科研服务咨询及技术服务的转化医学平台。

健坤禾润建有标准化的实验室，独立拥有一系列先进的硬件设施，包括confocal、流式仪、发光检测仪、MD酶标仪、实时定量PCR仪、独立细胞室、荧光显微镜等，并开展各种细胞原代分离、细胞处理、分子生物学、免疫生物学等研究，在细胞生物学、免疫学、分子生物学、蛋白质组学等领域已形成了专业优势。

健坤禾润拥有博士后、博士等一批专注于机制研究的科研人员。除单项技术服务之外，健坤禾润还可以为广大临床客户和科研工作者提供转化医学整体项目的方案设计、实验实施、数据分析、报告总结等一站式科研咨询和技术服务，目前我们已经与全国知名三甲医院、高校和科研院所建立了长期技术合作关系。

健坤禾润密切关注和跟踪国内外各个医学学科的研究动态与进展，用科研机制的方式验证、阐述疾病机理，提升科研的创新性和连续性。

服务内容涉及

分子生物学

qPCR；定点突变；多重PCR；数字PCR；SNP分型；核酸提取与纯化；基因克隆与表达质粒的构建

细胞生物学

细胞活力/增殖/凋亡/周期；细胞分离培养；荧光素酶报告基因试验；CRISPR/Cas9（细胞）；细胞转染/稳定细胞株构建；细胞共培养；细胞及亚细胞形态结构观测；EMT相关检测

免疫生物学

免疫组织化学（IHC）; ChIP/ChIP-seq/EMSA；Western-Blotting；免疫荧光（IF）；原位杂交（In Situ Hybridization）；IP/CoIP/CoIP-MS；酶联免疫吸附反应（ELISA）

蛋白质组学

蛋白芯片检测；蛋白质谱鉴定与序列测定；iTRAQ；双向凝胶电泳

官网：http://www.jkgreentech.com/

联系电话：010-88857418/19

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