细胞活力/增殖/凋亡/周期

实验介绍

细胞活力检测

可以通过测定线粒体酶活性或细胞膜完整性进行评估，并由总细胞中活细胞所占的百分比来衡量。

细胞增殖检测

用于动态跟踪一段时间内细胞的繁殖能力，一般通过活细胞计数法进行定点采集，或可通过检测细胞DNA的复制活性（如EdU法）对细胞增殖活力进行检测。

细胞周期检测

细胞周期的测定可以采用流式细胞仪测定法或BrdU渗入法。前者通过检测双链DNA荧光染料（如PI）与双链DNA结合后产生的荧光，反映双链DNA的含量，并通过分析DNA含量的分布情况，来进行细胞周期分析。后者利用BrdU（5-溴脱氧尿嘧啶核苷），一种胸腺嘧啶衍生物，可以作为细胞DNA复制的原料掺入复制的DNA中。若经过两个细胞周期，细胞中两条单链均含BrdU的DNA将占l/2，反映在染色体上应表现为一条单体浅染，如经历三个周期，则染色体中约一半为两条单体均浅染，另一半为一深一浅，计算分裂相中各期比例，就可算出细胞周期的值。

细胞凋亡检测

细胞凋亡的检测基于凋亡过程中细胞形态（荧光、共聚焦激光扫描及透射电子显微镜观察）、线粒体膜电位（Rhodamine123、DiOC6、JC-1、TMRM荧光染色法）及细胞膜完整性发生的变化（Annexin-Ⅴ-PI标记法），DNA断裂的产生（DNA Ladder/TUNEL法），以及凋亡相关蛋白（Caspase3、TFAR19）的活化与表达。

服务流程

客户提供

●   生长期活跃的哺乳动物原代细胞或细胞系（无支原体污染）

服务优势

●   先进的显微拍摄及荧光拍摄技术

●   便捷的流式细胞分析技术

●   丰富的哺乳动物细胞培养经验

●   规范化的细胞、分子生物学检测体系

●   真实清晰完整的报告呈现

北京健坤禾润科技有限公司（以下简称“健坤禾润”）成立于2011年4月，是一家提供专业医学科研服务咨询及技术服务的转化医学平台。

健坤禾润建有标准化的实验室，独立拥有一系列先进的硬件设施，包括confocal、流式仪、发光检测仪、MD酶标仪、实时定量PCR仪、独立细胞室、荧光显微镜等，并开展各种细胞原代分离、细胞处理、分子生物学、免疫生物学等研究，在细胞生物学、免疫学、分子生物学、蛋白质组学等领域已形成了专业优势。

健坤禾润拥有博士后、博士等一批专注于机制研究的科研人员。除单项技术服务之外，健坤禾润还可以为广大临床客户和科研工作者提供转化医学整体项目的方案设计、实验实施、数据分析、报告总结等一站式科研咨询和技术服务，目前我们已经与全国知名三甲医院、高校和科研院所建立了长期技术合作关系。

健坤禾润密切关注和跟踪国内外各个医学学科的研究动态与进展，用科研机制的方式验证、阐述疾病机理，提升科研的创新性和连续性。

服务内容涉及

分子生物学

qPCR；定点突变；多重PCR；数字PCR；SNP分型；核酸提取与纯化；基因克隆与表达质粒的构建

细胞生物学

细胞活力/增殖/凋亡/周期；细胞分离培养；荧光素酶报告基因试验；CRISPR/Cas9（细胞）；细胞转染/稳定细胞株构建；细胞共培养；细胞及亚细胞形态结构观测；EMT相关检测

免疫生物学

免疫组织化学（IHC）; ChIP/ChIP-seq/EMSA；Western-Blotting；免疫荧光（IF）；原位杂交（In Situ Hybridization）；IP/CoIP/CoIP-MS；酶联免疫吸附反应（ELISA）

蛋白质组学

蛋白芯片检测；蛋白质谱鉴定与序列测定；iTRAQ；双向凝胶电泳

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