酵母细胞表达|酵母细胞表达系统|蛋白表达

  酵母表达系统是一种最经济高效的真核蛋白表达系统，可以成功实现胞内表达或是分泌表达，且其放大培养基相对廉价，培养条件要求不高，适宜工业放大。与哺乳动物细胞表达系统一样，酵母蛋白表达系统能够对所表达蛋白进行例如糖基化、酰基化、脂基化、磷酸基化等保证蛋白天然构象的修饰，可用于制备非常接近天然蛋白的具有高附加值的蛋白原料。

　　武汉金开瑞生物工程有限公司的酵母蛋白表达平台由多年从事酵母表达操作的实验人员组成，经验丰富，采用自行改造的高效分泌载体和宿主组合，可在程度上实现质量的蛋白表达。经客户反馈，以我平台所制备的蛋白原料为抗原所制备的单抗均具有很好的识别天然蛋白的优良特性。

 

一、服务特色

1、专利的Biobrick技术，可以实现高效体外构建任意拷贝的基因剂量，实现表达量的提高，可成功用于工业菌种的改良优化。

2、采用自行改造的高效分泌载体：pPIC9K、pPIC9K高效融合载体、pPICZA、pGAPZa、pPaSUMO3，宿主GS115、KM71、X33的正交组合。PINK系统优化分泌表达信号肽。胞内表达采用自行改造的载体pPIC 3.5k载体和宿主GS115、KM71、X33的组合，可在程度上实现表达。

3、高效的种子筛选工作能使您所定制的蛋白在最短的时间内获得尽可能高的产量。

 

二、服务说明

服务流程

接受订单——合 成——纯 化——分 装——质 检——发 货——客户提供

目的蛋白信息或基因序列，质粒（也可以选择由金开瑞提供）；

蛋白询价信息表（请点击下载中心，下载蛋白询价信息表后详细填写）。

最终交付

纯化后蛋白纯品、表达菌株（收费）；

蛋白表达结题报告，包括测序报告、实验条件、蛋白表达纯化检测结果。

 

金开瑞生物拥有成熟的酵母表达技术，有需要的客户可以qq联系我：3013422302。

 

三、服务周期及报价

四、案例展示

案例1：经济型套餐

　　以下是通过我平台自行改造的pPIC9K载体和GS115宿主系统成功表达一种酶的经济型套餐实例。自接到订单至成功表达只用了20个工作日，亲和层析一步纯化得到蛋白纯度在95%以上。

案例2：标准型套餐

　　以下是一个需要做优化表达的标准型订单服务，客户要求表达一种药用蛋白，最后做工艺放大，对表达量有一定的要求，客户自己做了大量的工作但是表达量一直提不上去，我们从上游开始做表达优化，用了50个工作日，用我平台自己改造的pPIC9K载体和KM71H宿主在2.5mg/ml的G418浓度下获得一株令客户满意的工艺放大种子。

Fig. C: Expression ａnd secretion of pharmaceutical protein from P.pastoris.

Lane 1 :Expression level from customer.

Lane 2 :Expression level from Genecreate.

Lane 3 :Negative control.

Fig. D: Purification of the target pharmaceutical protein by SP-Sepharose.

 

案例3：工业菌株改良优化

　　以下是我平台成功完成的一个工业酶菌种对产量的优化提高工作，利用专利的Biobrick技术一共用了近60个工作日由单拷贝基因剂量构建到8拷贝的基因剂量，表达量由开始的0.5g/L的水平提高到2.4g/L的水平，提高了近5倍。

        Fig. E: single copy gene expression of industrial enzyme from P.pastoris.

        Fig. F: eight copy gene expression of industrial enzyme from P.pastoris.

备注：我们只提供抗HIS标签抗体用于表达产物的质控，客户要求用对应蛋白的抗体做western blot，则抗体由客户自行提供。

　　专利的Biobrick技术是集蛋白的高效表达和高活性于一体的新技术，以下是我们成功为一家知名公司开发的诊断试剂原料，经客户同意，我们公开下列数据：

备注：以上是利用化学发光平台开发的试剂盒过SFDA的panel结果：

其线性相关性如下：

如您对我们的酵母表达及其系统感兴趣或者需要技术支持，请您与我联系QQ：3013422302 ，或者浏览我们公司的网站http://www.genecreate.cn/，可以搜索到您想要的服务信息，武汉金开瑞生物工程有限公司期待和您的合作。

武汉金开瑞生物工程有限公司位于武汉国家生物产业基地，是一家专业致力于为全球制药企业、诊断试剂企业、科研试剂研发企业、高校和科研院所以及大型医院提供蛋白及相关研究技术服务的高新技术企业。
关注蛋白整体研究思路，围绕蛋白的读、解、写、用，金开瑞建立起蛋白组、检测分析、基因服务、病毒包装、蛋白表达、抗体制备六大核心技术平台。所有平台的实验室及技术团队都坚持自主建设，各平台技术负责人都有5年以上相关领域的工作经验，可以最大程度的保障了项目按时保质的实施。完整的技术平台及专业的技术团队，保证了金开瑞不仅可以提供单一项目的技术服务，还可以提供miRNA，lncRNA，蛋白质组学相关等多种整合性项目服务。
“读”——对生物样本中未知单一蛋白或复杂蛋白的序列解读，定量、定位检测；
“解”——采用基因手段（干预、敲除或过表达）对预测的蛋白信息进行确证和深入分析；
“写”——通过体外重组方法制备，并通过系列实验确认其结构与功能尽可能的接近天然状态；
“用”——与客户合作讲蛋白的检测和合成领域的成果开发到市场需求标准的产品或平台。
六大技术平台：
蛋白质组分析平台——iTRAQ、SWATH、SILAC、Label-free，各种蛋白质组定量技术协助您发现信号转导通路关键蛋白、发现疾病标记物、发现药物靶标。
检测分析平台——通过免疫学分析方法（WB、IHC、IF、IP、ChIP、ELISA等），获得蛋白定量、定位等各种信息，确定您的目标蛋白。
基因服务平台——立足中心法则，围绕DNA/RNA/蛋白质开展全方位基因研究服务，合成&测序、载体构建、定点突变、qRT-PCR、RACE、CRISPR/Cas9……助您全面奠定蛋白研究基础。
病毒包装平台——13000种人源克隆库，各种功能载体，提供慢病毒、腺病毒、腺相关病毒包装及慢病毒稳转细胞株筛选服务，是您进行基因功能研究的绝佳助手。
蛋白表达平台——提供从基因合成到蛋白表达的一站式服务，史上最全的六大表达系统，噬菌体展示技术，帮助您获得任意想要的蛋白。
抗体定制平台——单/多克隆抗体、人源化抗体、基因工程抗体、双特异性抗体、修饰抗体、诊断抗体、小分子抗体、抗体对……真正保证型应用型抗体定制，只有您想不到，没有我们做不到。

金开瑞坚持“以客户为中心”，专注于蛋白及相关研究，致力于做您最贴心的蛋白研究合作伙伴。