慢病毒包装

当代基因治疗研究的热门方法是将外源基因DNA或RNA片段导入靶细胞或组织，研究靶基因的上调或抑制情况。例如，有些异常基因（癌基因、病毒基因），可通过反义核酸技术引入外源片段将其抑制；有些基因本身有治疗作用，体外合成该基因导入体内使其表达丰度提高。

常用的几种病毒载体的区别

病毒载体已成为当前基因治疗载体研究的热点，其优势在于：

1、病毒包装技术经历了多年的研究，已趋于成熟，可用于产业化大量生产
2、病毒基因组的结构简单、分子背景比较清楚，稳定易于改造、易于制备
3、病毒的宿主范围广，且具有高效的靶向特异性
4、在目的基因表达方面相对于脂质体介导的效果更明显、长时、稳定
5、通过载体改造的方式形成了复制缺陷型结构，安全性高

慢病毒（Lentivirus） 载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。作为快速有效的遗传物质投递工具，慢病毒的应用在生物医疗研究领域已广泛流行。

特点

1、区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力，常用于感染难转染的细胞，如原代细胞、神经元细胞、干细胞、不分化细胞、心肌细胞、肝细胞、内皮细胞、肿瘤细胞，且效率近100%
2、可装载DNA片段容量高达6kb
3、目的基因进入到宿主细胞之后，经过反转录，整合到基因组，形成稳定遗传物质，使得目的基因在细胞中可稳定长期表达。
4、病毒载体颗粒通过包装元件和含病毒基因组质粒共转染包装细胞系。利用逆转录机制构建自我失活(SIV)的HIV-1来源的载体,一旦转移到靶细胞后,它就丧失了病毒长末端重复的转录能力,减少了产生重组病毒的机会,并避免了与启动子干扰的问题。

综上特点决定了其应用

用慢病毒载体携带目的基因比用质粒瞬时转染更适于稳转株构建
载体带有可进行高效率的包装、转染并稳定整合进靶细胞的基因组中的序列元件，其产生滴度更高，为活体动物模型实验提供高性价比的包含目的基因的病毒液
其高转导效率及整合到基因组的特点为RNAi和cDNA 克隆以及报告基因的研究提供了一个有利的途径

慢病毒包装服务流程

1、制备DNA/转染试剂复合物
2、转染工具细胞：通常使用293T细胞
3、收获病毒
4、去除蛋白等杂质
5、检测滴度

服务提供

1、不少于1ml慢病毒包装产物
2、滴度不低于108
3、提供对照载体
4、提供包含实验过程和中间结果的详细技术报告

注意要点

1、包装好的病毒可以根据用户要求感染目的细胞
2、RNA干扰慢病毒提供三条不同的shRNA序列

服务周期

3-6周

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