MALDI-TOF 分子量

——即蛋白质（多肽）分子量的分析技术服务

基质辅助激光解吸飞行时间质谱（MALDI）其基本原理为用激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜，基质从激光中吸收能量传递给生物分子，而电离过程中将质子转移到生物分子，而使生物分子电离的过程。它是一种软电离技术，适用于混合物及生物大分子的测定。MALDI-TOF-MS具有灵敏度高、准确度高及分辨率高等特点，为生命科学等领域提供一种强有力的分析测试手段，并正扮演着越来越重要的作用。

“MALDI-TOF分子量分析，是蛋白质药物样品理化分析的起点之一”

技术指标

●  样品要求：

含盐量：挥发性无机盐<20mM，不挥发性无机盐<5mM；

样品蛋白质总含量>50pmol，纯度>90%；

样品应尽量保持其纯度，不要添加任何保护剂或其它物质。

●  4800 MALDI-TOF/TOF技术特性：

激光器：ND : YAG，波长355nm，频率200HZ；

检测模式：正离子和负离子模式；

离子飞行管：线性（Linear）模式=3750px，反射（Reflector）模式=7500px。

●  多肽蛋白质样品分析：

多肽样品测试分辨率可以达到18000以上，小蛋白质样品测试分辨率可以达到10000以上，大蛋白质样品测试分辨率可以达到5000以上。

案例分析

蛋白质类质谱分子量测定

(1) 样品信息：抗体样品，理论分子量为140,000Da

结果图谱：

抗体类蛋白质样品的MALDI-TOF分子量测定图谱

(2) 样品信息：PEG修饰样品，理论分子量为4300Da

Q&A

         ■ 根据蛋白质样品分子量大小不同选择不同的基质：

         ■ Mr<10KDa，α-Cyano-4-hydroxycinnamic acid (CHCA)；

         ■ Mr>10KDa，Sinapinic Acid (SA)；

         ■ 部分糖蛋白质样品测试选择基质为：Super DHB。

         ■ MALDI-TOF测定蛋白质样品分子量较为简便快捷、通量高，且测试结果为单电荷无需再进行数据处理，但对于大分子量蛋白质样品，只能获取样品平均分子量。LC-MS测定分子量较为繁琐复杂、通量较低，且测试结果为多电荷，一般需去卷积处理，对于大蛋白可获取较准确分子量信息。