利用LC-ESI-MS/MS蛋白鉴定技术对胶条样本(即SDS-PAGE样本)、IP、co-IP、Pull-down等纯化溶液等中等复杂样本进行蛋白鉴定。
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产品定义
利用LC-ESI-MS/MS蛋白鉴定技术对胶条样本(即SDS-PAGE样本)、IP、co-IP、Pull-down等纯化溶液等中等复杂样本进行蛋白鉴定。
SDS-PAGE样本
Co-IP实验质谱检测
技术原理
电喷雾(ESI)技术是将待测分子溶解在溶剂中通过HPLC分离,以液相方式通过毛细管达到喷雾口,在喷雾口高压电场作用下形成带电荷的微滴,随着微滴中的挥发性溶剂蒸发,微滴表面的电荷体密度随半径减少而增加,达到某一临界点时,样品以离子化的方式从液滴表面蒸发,进入质量分析器。
Ⅰ 电喷雾离子化方式容易形成多电荷离子,因此在较小的M/Z范围内可检测到大分子质量的分子;
Ⅱ 采用液相方式进样,一般与液相色谱(LC)联用,可以对复杂样品进行质谱分析,根据样品在色谱中不同的保留时间对其进行分离后鉴定,大大提高了分析的效率和精确度。
电喷雾(ESI)工作原理示意图
实验流程
使用仪器
Thermo Scientific LTQ-Velos Thermo Scientific Q Exactive
技术优势
适合中度复杂的蛋白质样品,如相互作用的蛋白质条带;
高准确性 高灵敏度。
应用领域
蛋白质或多肽鉴定
样品需求
样品 |
样品要求 |
SDS-PAGE条带 |
考染、银染(质谱兼容)条带清晰可见 |
蛋白质溶液 |
蛋白质总量>5μg,浓度>0.1μg/μl; 缓冲液不含去污剂NP40、Triton X-100等 |