SNaPshot法SNP分型

一.试验原理

   该技术由美国应用生物公司（ABI）开发，是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术，也称小测序，主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中，引物延伸一个碱基即终止，经ABI测序仪检测后，根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点，根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类，从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得，通常用于10-30个SNP位点分析。

二.试验流程

• DNA 提取和质检；
• 引物设计与合成；
• 扩增反应；
• 延伸反应；
• 测序仪检测；
• 数据分析。

三.优点

    1、通量高，一次反应可扩增最多10-15个位点；

    2、数据完整性高，相对于MassArray高通量分析的时候经常发生个别样本失败或者个别位点丢失的情况，MassArra方法丢失的数据进行补充造价很高，一般不会补，而该方法可以以较低成本补充实验；

    3、适应性强，实验结果可靠，该方法是ABI公司在10多年前开发成功的，历经了很多验证，发表了大量文章。

四.送样要求：

    1、组织样本：-20℃或-80℃低温冰箱中保存，液氮或者干冰运输；市内或短途运输可冰袋运输。若提供的材料为新鲜组织、血液细胞等生物材料，请提供足够提取2ug以上基因DNA的材料量。

    2、DNA样本：体积≥50ul，浓度≥50ng/ul，DNA总量≥2ug，纯度 OD260/280 在1.7～1.9之间，不含PCR抑制剂，须注明准确浓度。样品须低温冰袋运输。

    3、血液样本：要求保存于抗凝管中或冻存管中，体积大于2ml，请用干冰运送，保证DNA不降解。

    4、样品为石蜡包埋组织切片的，要求提供10张组织切片光片（面积>10mm×10mm,厚度约5-10um）。

      北京博友顺生物技术有限公司，经过几年的发展公司更专业于分子标记技术服务。公司致力于：基因组SSR引物开发、AFLP检测、SSR/STR技术服务、ISSR、MSAP、SNP基因分型、条形码分析、克隆分子实验。本着“质量第一，服务至上”的原则为各大院校、医院、科研院所等单位，提供优质的产品和服务，最大程度的满足用户的需要。

       公司感谢广大老师五年来对公司的厚爱和支持，将再接再厉为广大老师做好科研后勤工作。我们非常庆幸能成长在生物行业刚刚起航的年代里，能跟随各位老师前辈们共进步、共成功