蛋白质真核细胞表达技术服务

蛋白质真核细胞表达技术服务

   

 我们通过有效的实验优化和质量控制来保障实验的成功：

• 我们会对客户提供的蛋白质信息进行评估，并制定相应的表达策略。
• 我们所用实验材料均为知名产品，以保障表达蛋白的质量。
• 我们会阶段性的汇报实验进展。

实验安排：

时间安排	实验内容	款项
第1-2周	从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列，确定蛋白质表达策略 根据选用的表达系统对cDNA进行密码子优化 合成设计好的基因序列 代转染细胞株培养	免费设计， 合成费用5.50元/碱基。 如客户直接提供可用表达质粒，则免去这步及费用。
第3-4周	扩增并抽提含有目标基因的载体质粒 将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上（GST & HIS Tag） 测序验证构建质粒的准确性	1500元
第5-6周	扩增并抽提构建好的表达质粒 将表达重组质粒转染到目的细胞中 重组蛋白表达评估和条件优化 SDS-PAGE电泳、Western blot检测已表达的重组蛋白	4500元
第7-9周	筛选稳定转染的细胞，单克隆筛选和重组蛋白表达检验 小规模蛋白表达和纯化（500 ml培养物），通过亲和及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白	10500元，
	大规模蛋白表达和纯化	4500元， 根据不同蛋白表达含量不同，每加1L培养液，加收1800元。
提供给客户：纯化好的目标蛋白1~5mg及纯化报告		>21000元

 

 

 

 

注意事项：

 

1， 项目经讨论确定好实验方案后，前期设计好“最简单步骤”，后期根据实验进展，以增加目标蛋白的表达量和纯度为目的，和客户讨论增加实验内容。整个项目分2部分收款，预付款为“最简单步骤”收费的80%，尾款为“最简单步骤”费用的20%及后期增加实验内容的费用总和。

 

2，因为每个重组蛋白的表达量及纯化得率都不相同，我们最终根据实际情况将给客户提供最少1mg，最多5mg的目标蛋白，所收取的费用是相同的，需要更多蛋白量时，按增加实验步骤收取费用。

3， 我们提供的最终产品一般为保存于常规的缓冲液（Tris-HCl，PBS或乙酸-乙酸钠缓冲液）中蛋白质溶液，并且其中不含有尿素或盐酸胍等变性剂。

4，每次Western blot检测最多7个样品，因为要加入阳性对照，阴性对照以及Marker。本步骤只包含一次免费检测，如果需要更多次检测则费用为1200元/次。

 

5，免费为客户提供抗His-tag的一抗，如果客户需要使用其他一抗，则需要客户提供。

 

6，客户可在任何时间终止项目，但仍需支付项目终止之前已经完成的工作所产生的相应费用。

 

美德生物荣誉出品

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