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荧光显微镜拍照技术服务
赛百慷除专业提供原代细胞、细胞株/系产品外,还提供其他相关技术服务,如ELISA检测、q-PCR、细胞STR检测等,详见公司网站www.icellbioscience.com.
服务类别:分子与细胞总访问:1766
最后更新:2019-6-26半年访问:18
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技术服务详细描述

荧光显微镜照相流程
1. 将玻片置于显微镜之载物台上,并开启显微镜光源。
2. 绿色按钮(ON)打开荧光光源,利用荧光光路的栅栏板(shutter)遮断荧光。
3. 将显微镜目镜右侧之分光钮拉开至1/2处(会有喀一声的感觉)此时可同时用相机目镜及显微镜目镜观察(注意相机目镜右侧的分光钮是否有拉开,若没拉开,是无法在相机目镜看到东西的)。
4. 调整相机的焦距:旋转相机目镜,至可清楚分辨相机中的八条线为止,调好之后就不再动相机目镜。
5. 将ASA 100之底片装入相机,打开相机之电源(荧光显微镜光源控制器上方那台,开关在右侧)。
6. 拍照可选择让相机自动决定曝光时间(把NIDE/EXPOSURE TIME钮转到AUTO,也就是设定为AUTO的模式)或是自行决定曝光时间(把MODE/EXPOSURE TIME设定在MANUAL,也就是设定为MANUAL的模式)。
7. 若决定用AUTO,必须注意的是虽然使用ASA 100底片,但ISO/ASA值
最好设到最大,也就是6400(由100转到6400),让相机认为用的是6400
度的底片,增加EXPOSURE ADJ.值也可减少曝光时间(荧光照相对比强
烈,相机往往会增加曝光时间来补背景的光,这是我们不希望见到的,所以要利用各种方法来减少曝光时间)。
8. 若决定用MANUAL来控制曝光时间,只须设定曝光时间即可(把MODE/EXPOSURE TIME钮转到想曝光的时间,例如32秒钟),若使用AUTO无法达到要求得质量,可以自行设定曝光时间,来得到较好的效果,建议是以10秒为单位,渐次增加时间,视效果来决定曝光时间。
9. RECIPROCITY钮的设定因底片的种类不同而定,可将机器下方的白色压克力片拉出参考即可,例如若用KODAK 400度的底片就把RECIPROCITY钮设定为6。
10.  将载物台下方之黑色遮光片推入遮住显微镜光源,打开荧光光路栅栏板(shutter),此时只剩荧光之光源。
11.  找到材料,调整焦距。
12.  从相机目镜观察材料,因为相机目镜具放大作用,所以显微镜下看到得
    大小会和相机内看到的不一样,所以在此时须再调整一下位置,甚至是
    倍率,调整好后,可将显微镜的分光钮完全拉开(现在所有的光线都分
    到相机了)。
13.  利用相机目镜观察时,可能会发现材料的焦距不对,须调整显微镜的细
    调节轮,焦距调好,就可准备照相。
14. 观察材料,寻找欲拍摄的部份。
15.  若已选定曝光时间,按下AE LOCK钮,可使选定的时间锁定(因为计时
    器常会有不规则跳动的情形),若要让相机重新测定曝光时间,或是自  
    己有更改曝光时间,都要再按一次AE LOCK(解除锁定),当AE LOCK
    灯亮时,无论如何更改设定,曝光时间都不会改变。
16.  当一切准备就绪,将相机目镜旁右边的分光钮压下,再按下EXPOSE(左 
    下方之绿色按钮),等待曝光完成,即完成照相动作

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