慢病毒背景介绍
慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而达到良好的基因治疗效果。由于有些类型细胞脂质体转染效果差,转移到细胞内的siRNA半衰期短,体外合成siRNA对基因表达的抑制作用通常是短暂的,因而使其应用受到较大的限制。采用事先在体外构建能够表达siRNA的载体, 然后转移到细胞内转录siRNA的策略,不但使脂质体有效转染的细胞种类增加,而且对基因表达抑制效果也不逊色于体外合成siRNA,在长期稳定表达载体的细胞中,甚至可以发挥长期阻断基因表达的作用。因此,人们常用慢病毒载体将目的基因(或shRNA)导入动物、人原代细胞或细胞系
慢病毒的技术特点
1、侵染效率高:分裂期和分裂间期的细胞,包括造血干细胞,神经干细胞,处于分化终末的神经元,肝实质细胞等
2、多启动子:包括细胞特异性启动子和管家基因的启动子
3、整合效率高:目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加
4、容量大:能够插入大的片段(~8kb)
5、低毒性
6、快速获得高水平的表达
7、将免疫反应降到最低
本公司提供的载体
此外,本公司提供另外两种服务项目:
慢病毒稳转过表达细胞系构建技术
慢病毒shRNA稳定沉默细胞系构建技术
品质保证
客户自己提供的序列委托我们制备的病毒颗粒,我们确保制备的病毒颗粒携带片段的正确性,确保病毒颗粒的总数和病毒颗粒的滴度达到合同规定的要求。
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北京唯尚立德生物科技有限公司是一家致力于生命科学领域相关技术项目开发的公司。公司核心团队由海外归国学者和毕业于国内顶尖学府的博士组成。目前已建立起一系列完善的技术平台。
公司具有大规模快速组装TALEN的核心技术,以及完善的慢病毒包装、细胞系构建、模式生物构建、miRNA相关全套技术服务平台,目前主要业务为客户提供快速高品质的TALEN靶向基因敲除相关服务和miRNA相关全套技术服务。作为国内最早开始提供TALEN靶向基因敲除技术服务的公司之一,我们在短短一年之内已经为客户和合作伙伴提供了1000多对验证活性的TALEN质粒,多例靶向基因敲除的小鼠、基因敲除及敲入的细胞系以及基因敲除的斑马鱼等高品质服务案例,多个合作客户已经成功完成了靶向基因敲除干细胞系的构建以及基因敲除猪的构建。
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