本实验室现提供肿瘤细胞培养技术服务, 肿瘤成功关键在于:取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面,肿瘤与正常组织并无原则差别,初代培养应用组织块和消化培养法均可。
1.取材:
人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要,体积较大的肿瘤组织中有退变或坏死区,取材时尽量避免用退变组织,要挑选活力较好的部位。癌性转移淋巴结或胸腹水是好的培养材料。取材后宜尽快进行培养,如因故不能立即培养,可贮存于4℃中,但不宜栽过24小时。
2.培养基:
肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格,一般常用的 RPMIl640、 DMEM、Mc-Coy5A等培养基等皆可用于肿瘤。肿瘤细胞对血清的需求比正常细胞低,正常不加血清不能生长,肿瘤细胞在低血清培养基中也能生长。肿瘤细胞对培养环境适应性较大,是因肿瘤细胞有自泌(Autocrine)性产生促生长物质之故。但这并不说明肿瘤细胞完全不需要这些成分。按不同细胞需要不同的生长因子;肿瘤细胞与正常细胞之间、肿瘤细胞与肿瘤细胞之间对生长因子的需求都存在着差异。但大多数肿瘤中仍需要生长因子。有的还需特异性生长因子〔如细胞等)。总之培养肿瘤细胞仍需加血清和相关生长因子培养更易成功。
3.成纤维细胞的排除:
成纤维细胞常与肿瘤细胞同时混杂生长,致难以纯化肿瘤细胞。而且成纤维细胞常比肿瘤细胞生长得快,最终能压制肿瘤细胞的生长。因此排除成纤维细胞成为肿瘤中的关键。
联系电话:13661449330,宋老师。QQ。另本实验室还提供流式细胞检测,流式分选,荧光定量PCR,半定量RT-PCR,Western Blot,ChIP染色质免疫共沉淀,免疫组化,高效液相蛋白芯片,transwell细胞小室,靶基因预测,细胞培养,PCR产物纯化及形态学(石蜡切片,冰冻切片,免疫荧光,HE染色,拍照,细胞爬片等)。