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mRNA螢光定量PCR(Real Time-PCR)服務
mRNA螢光定量PCR(Real Time-PCR)服務
服务类别:分子与细胞总访问:970
最后更新:2012-12-27半年访问:4
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服务内容和标准

Step1

A.RNA抽提: SLNco高纯度RNA抽取试剂盒

RNA质量检测:
(1)测定RNA在260nm和280nm波长处的吸收值,以计算其浓度并评估纯度。
(2)变性琼脂糖凝胶电泳,检测RNA纯度及完整性。

RNA提取项目

Step2

B.引物设计和合成

引物合成项目

Step3

C.逆转录:使用逆转录酶(AMV)将样品RNA逆转录为cDNA。

RT-PCR项目

D.标准曲线制备:将标准品质粒做梯度稀释后,进行real-time PCR扩增和检测,以Ct值对拷贝数绘制标准曲线。

E.定量PCR反应:将待测样品加入优化过的real- timePCR反应液中,进行扩增,检测目的基因和内参基因的Ct值。每反应均做3个平行复孔。

F.数据分析:
(1)相对定量:使用△△Ct法计算目的基因在不同组间的表达差异。
(2)绝对定量:将样品的Ct值代入标准曲线,以对目的基因进行

定量。
(3)熔解曲线分析:确定产物特异性。

 

项目及收费(小于50个样本且少于5个基因)

 

核酸提取项目

样本数量(A)

单价/个(P)

折扣(D)

收费公式

/

50

/

A×P×D

引物设计加合成项目

合成条数(A)

单价/条(P)

折扣(D)

收费公式

/

150

/

A×P×D

Taqman探针设计加荧光合成项目(仅限Taqman用户,Sybr Green用户可忽略)

合成条数(A)

单价/条(P)

折扣(D)

收费公式

/

1500

/

A×P×D

荧光定量RT-PCR项目

样本数量(A)

基因数目/个(G)

折扣(D)

收费公式

/

/

/

A×(180+(G-1)×110)×D

公式解释:首条基因180rmb,后续每条110rmb。

 

客户需提供:
1.新鲜的组织样品、细胞样品或抽提好的总RNA,干冰保存。
2.背景资料:目的基因的Gene ID、样品来源和mRNA丰度等。
3.如需绝对定量,则用户需要提供标准品质粒。若需要标准品质粒制备,请详见《克隆转化服务》。

 

 


电 话:86-21-65030614-210 86-21-65030607

境内联系人:刘小姐

海外联系人:李先生 尼辛

EMAIL:jean@yh-keji.com  export@yuhua-asia.net

 http://www.yuhuashengmingkeji.com

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