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过表达慢病毒包装技术服务
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过表达慢病毒包装技术服务
一、慢病毒背景介绍
慢病毒（Lent virus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展而来的基因载体，该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，达到持久性表达的效果。可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，效果非常理想，具有广阔的应用前景。
慢病毒包装系统由慢病毒表达载体和慢病毒包装载体组成。慢病毒表达载体，即通常所说的穿梭载体，包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒则可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒，需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞（293包装细胞），在细胞中进行病毒包装，包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中，离心取得上清液后，可以直接用于宿主细胞的感染。
百恩维的慢病毒包装系统是四质粒包装系统。百恩维技术团队已进行过多种目的基因的慢病毒包装，具有丰富的科研经验。现有客户包括研究所、医院、生物公司等。
二、慢病毒包装技术服务包含内容：
（一）慢病毒载体的构建：
将目的基因克隆构建到慢病毒载体，根据不同的研究需求，有用于基因过表达的慢病毒载体、用于RNAi的慢病毒载体、用于启动子活性研究的慢病毒载体等；
（二）慢病毒包装：
- 得到的慢病毒载体，与辅助载体一起转染293T细胞进行包装；
- 将包装好的病毒超速离心收集；
- 将浓缩病毒进行滴定，滴定结果单位为TU/ml。
（三）慢病毒鉴定与质量控制：
- 测序鉴定
- 根据特定引物作RT-PCR鉴定
- 蛋白表达鉴定（根据客户要求）
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