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慢病毒、腺相关病毒包装实验技术服务
艾游生物提供慢病毒、腺相关病毒包装实验技术服务
服务类别:分子与细胞总访问:1054
最后更新:2012-4-7半年访问:18
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慢病毒包装

产品介绍:
       慢病毒载体(Lentiviral vector, LVs)是在HIV-1病毒基础上改造而成的病毒载体系统,它能高效的将目的基因(或RNAi)导入动物和人的原代细胞或细胞系。慢病毒载体基因组是正链 RNA,其基因组进入细胞后,在细胞浆中被其自身携带的反转录酶反转为DNA,形成DNA整合前复合体,进入细胞核后,DNA整合到细胞基因组中。整合后 的DNA转录mRNA,回到细胞浆中,表达目的蛋白;或产生RNAi干扰。
      慢病毒载体介导的基因表达或RNAi干扰作用持续且稳定,原因是目的基因整合到宿主细胞基因组中,并随细胞基因组的分裂而分裂。另外,慢病毒载体能有效感 染并整合到非分裂细胞中。以上特性使慢病毒载体与其它病毒载体相比,比如不整合的腺病毒载体、整合率低的腺相关病毒载体、只整合分裂细胞的传统逆转录病毒 载体,有鲜明的特色。大量文献研究表明,慢病毒载体介导的目的基因长期表达的组织或细胞包括脑、肝脏、肌肉、视网膜、造血干细胞、骨髓间充质干细胞、巨噬 细胞等。
     慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白,免疫原性低,在注射部位无细胞免疫反应,体液免疫反应也较低,不影响病毒载体的第2次注射。

技术特点:
    1、将目的基因/RNAi基因转入难以转染的细胞,比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞;
    2、制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株;
    3、将目的基因/RNAi基因转入动物组织,以期获得长期表达;
    4、转基因动物,特别是转基因大鼠的制备。

服务流程:

    

    A. 慢病毒载体的构建:

        根据不同的研究需求构建慢病毒载体,如用于RNAi的慢病毒载体、用于基因过表达的慢病毒载体、用于启动子活性研究的慢病毒载体等;


    B. 慢病毒包装过程:

         将重组病毒质粒及其辅助包装质粒共转染至包装细胞中,收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,对其浓缩后得到高滴度的慢病毒浓缩液,在293T细胞中测定并标定病毒滴度。

应用案例:

   

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