慢病毒包装服务

服务特点

1、根据客户实验需要灵活定制慢病毒载体包装服务，满足客户研究的多种需要。
2、慢病毒纯化服务根据实验要求不同，包括细胞实验级纯化和活体实验级纯化，您可以根据具体需要选择不同的纯化方式，帮助您节约实验成本。
3、病毒滴度测定采用荧光细胞流式细胞技术或者感染细胞基因组DNA RT-PCR检测，病毒滴度直接体现病毒感染效果。比采用检测p24或者病毒颗粒计数更加准确可靠。
 

慢病毒包装步骤

1、慢病毒载体质粒和包装质粒质粒共转染293T细胞；

2、培养48~72h，收集培养上清；

3、病毒纯化和浓缩；

4、滴度测定、目的基因检测；

5、出具检测报告；

6、干冰运输发货。

慢病毒纯化

根据客户需求，对不同用途的慢病毒产品，我们分别采用细胞实验级和活体实验级两种纯化方式。细胞实验级纯化采用超速离心法对病毒颗粒进行纯化浓缩。这种纯化方法的优点在于纯化价格比较低，产品质量能满足细胞实验需要。但由于纯化方法相对比较剧烈，最终的纯化产品中存在一些碎裂的病毒成分如病毒蛋白、以及少量残留细胞培养产物和助沉淀剂。这些成分在用于活体实验时可能会引起动物的免疫反应，但在细胞实验中一般不会产生影响。

活体实验级纯化采用温和的亲和层析纯化，极少发生病毒碎裂从而大幅减少病毒蛋白释放。由于对病毒颗粒的选择性亲和，杂质蛋白和成分极少，一般不会引起实验动物免疫反应，适合用于活体实验。

滴度测定

1、带有GFP或DsRED荧光标签的慢病毒载体。采用病毒感染细胞后直接进行流式细胞计数，计算病毒滴度。

2、不带荧光标签的慢病毒载体。采用病毒感染细胞后，提取细胞DNA，进行实时定量PCR，计算进入细胞的病毒DNA拷贝数。

以上两种检测方法通过对病毒感染的活细胞数量计数，直接体现病毒的感染力，即有活性的病毒数量。常见的病毒滴度检测方法如病毒颗粒计数和p24检测，无活力病毒和病毒蛋白碎片也会进入计数范围。滴度不能反映病毒的使用效果。

产品质量控制

质量指标包括：

* 载体质粒构建检测

* 产品无菌检测

* 滴度检测

* 目的基因的PCR检测

http://www.inovogen.com/lentivirus/lentiviruspackaging/

北京英茂盛业生物科技有限公司专业从事分子生物学技术服务。我们提供从基因的合成、获取、表达载体构建、蛋白表达到基因RNA干扰，以及稳定细胞系筛选。其中慢病毒包装、RNA干扰和稳定细胞株筛选已经形成一套成熟的体系。公司的成员均为硕士和博士，有着多年专业分子生物学技术实践经验，已经成功为中科院、北京大学等知名研究院所和多家制药企业提供技术服务。另外我公司现销售各种生化试剂，实验室耗材等。

我们致力于新技术研发和改良，陆续推出了TAL合成服务、RNA体外转录服务、蛋白包涵体复性服务、抗体制备服务等新服务。我们必将以务实的科研态度，积极进取的探索精神，在新领域里取得更加丰硕的成果。

我们的宗旨是“提供最好的服务给客户”。在此宗旨的指引下，我们始终坚持业内最高的服务水平，不断提升服务质量。我们深知科研工作的时间宝贵，因此致力于提高效率，提供优质高效的服务。我们以客户的利益为己任，严格保护客户的资料和信息。相信在正确的宗旨指引下，英茂盛业将会与广大客户一起共同成长.