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siRNA/shRNA载体构建
siRNA/shRNA载体构建
服务类别:分子与细胞总访问:1657
最后更新:2012-2-28半年访问:14
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服务商: 百奥迈科生物技术有限公司 查看该公司所有服务 >>
  • 服务介绍
  • 公司简介

目前用于实验研究及药物靶点筛选的siRNA合成方法主要有两种:载体介导表达siRNA和化学合成siRNA。化学合成siRNA具有沉默效率较高的优点,但在体内的作用时间较短,且一次性消耗,无法获得克隆;构建siRNA质粒可以在E.coli内复制扩增,真核细胞内作用时间较长,且质粒可长期保存,同时可测序保证其100%序列同源性。

  

技术特点:
1)多种siRNA 表达载体,可以在细胞内直接转录出siRNA,行使其RNAi 功能,包  括以下常用载体:
 
载体名称 启动子 筛选基因 标记基因
pRNAi-U6.1/Neo  U6  Neomycin  GFP 
pRNAi-CMV3.2/Neo  CMV  Neomycin  GFP 
pRNAi-CMV4.1/Neo
(pSilencer4.1) 
CMV  Neomycin     
2)载体带有GFP 标签可以监测转染效率。构建好的siRNA 表达载体可直接用于转染细胞进行RNAi 实验;
3)本公司还可根据客户需要提供各种商业化表达载体;
4)本公司可以为客户构建线性siRNA 表达载体,shRNA 表达载体,miRNA 表达载体以及病毒型RNAi 载体。
 
构建流程:
1)siRNA 靶点设计;
  • 客户提供靶基因的siRNA 序列,由本公司将其克隆到siRNA 表达载体上。
  • 客户提供靶基因的相关信息(基因的mRNA 序列或Genbank Accession No.),  根据客户要求,本公司设计高效特异性的3-4 条针对靶基因的siRNA,并可免费提供阴性和阳性对照质粒,便于客户使用。

2)合成设计好的DNA 并退火形成双链DNA,克隆到客户要求的载体上。
3)通过测序进行验证。
4)构建成功的siRNA 质粒连同测序报告、产品说明书一起寄送到客户手中。
质量保证:
符合设计要求的siRNA 序列测序结果和实验报告。

 siRNA/shRNA载体构建 报价表: 

服务内容 报价
单独构建一条 siRNA/shRNA载体  1000元
构建3-4条siRNA/shRNA 载体 800元/条

注:可根据客户要求提供siRNA 的阳性及阴性对照质粒。
 

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