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siRNA/microRNA/过表达慢病毒包装(慢病毒载体构建,慢病毒包装,滴度测定)
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服务商: 百奥迈科生物技术有限公司 | 查看该公司所有服务 >> |
慢病毒载体包装服务
1 特点:
1) 直接包装成为假病毒颗粒,对分裂和非分裂细胞均有感染作用,适合研究和体内实验中
难于转染的细胞 (比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞)。
2) 可以通过简单方式,在短时间内获得稳定表达特定基因的多种细胞株。
3) 可用于基因敲除、基因治疗和转基因动物研究。
4) 无需任何转染试剂,操作简便。
5) 可以根据客户需要制备多种标记。
2 原理:
慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,
另一方面,Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转
染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞
的基因组,进行长时间的稳定表达。
3 慢病毒包装简要流程:
1) 含有目的基因的慢病毒siRNA/microRNA 载体或过表达载体的构建和质粒纯化提取。
2) 慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞。
3) 培养48hrs - 72hrs 左右,收集含有病毒的上清培养液。
4) 病毒的纯化和浓缩。
5) 分装、- 80 oC 保存。
6) 滴度测定目的基因检定,并出具检测报告。
4 本公司提供的最终产品包括:
1) 重组后的慢病毒载体质粒以及测序图谱。
2) 产品无菌检测结果。
3) 慢病毒储液及相应的病毒滴度。
我们保证:1) 制备的病毒颗粒携带片段的正确性2) 病毒颗粒的总数和病毒滴度:如无特殊要求我
们提供1mL 滴度为1×107 - 1×108 / mL 的病毒储液。