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质粒构建(基因调取,基因合成,质粒构建,载体构建,亚克隆)
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服务商: 百奥迈科生物技术有限公司 | 查看该公司所有服务 >> |
我公司拥有成熟的分子生物学技术平台。可根据客户需求,以极具竞争力的价格和快捷的交货时间提供全长基因获取及相关服务。获取的目的基因片段可以根据客户的需求连接到不同的载体上等配套的上游和下游服务。最终提供的产品包括详细的实验报告、测序报告、质粒酶切图谱、冻干质粒以及含有该质粒的菌株。
1. 服务特色
免费提供基因的参考设计方案,包括设计酶切位点,密码子优化等。
忠实执行保密合同,为客户负责。
质量可靠,提供DNA 测序结果,保证所获取的基因序列100%准确。
基因克隆到用户指定或提供的表达载体上。
2. 适用范围及优点
自然界中无法以常规实验手段得到的目的基因。
研究人员根据自己的意愿设计得到自然界中不存在的基因。
大量合成用于微芯片的cDNA。
克隆人鼠抗体或重组抗体。
根据基因结构功能研究的需要对基因进行修正。
设计基因治疗载体。
对已知基因序列进行密码子优化重排,从而在异源宿主菌中进行高效表达或获得新的生物特 性等研究目的:异源宿主菌中表达目的基因,由于密码子偏爱性可能会出现序列不相容,导致蛋白表达量很低甚至不表达,对目的基因密码子进行优化从而解决这个问题。
载体的构建
质粒载体构建是现代生物学研究中最重要的工具之一。由于影响因素较多,对研究者经验要求较
高,因而往往费时费力。百奥生物拥有长期从事分子生物学工作的专业人力资源,为客户提供高
效、快捷、高质量的服务。
1.1 服务内容:
1.1.1 以动物组织或细胞为模板,提取获得DNA 或cDNA,从中扩增目的基因。可应客户要求,将基因片段亚克隆至各载体。
实验步骤:
(1) 从动物组织或细胞中获取DNA 或cDNA,
(2) PCR 扩增相关基因连接至PUC57 载体,测序,
(3) 将测序后符合要求的基因,亚克隆至目的载体,
(4) PCR 及酶切鉴定,
(5) 对构建好的目的载体进行测序.
1.1.2.由客户提供已带有目的基因片段,通过PCR 从中扩增基因,并将之克隆至目的载体。
实验步骤:
(1) PCR 扩增相关基因,连接至PUC57 载体测序。
(2) 将测序后符合要求的基因或功能元件片段亚克隆至目的载体。
(3) PCR 及酶切鉴定,
(4) 对构建好的目的载体进行测序.
1.1.3 由百奥迈科生物根据客户提供的NCBI 序列信息,采用全基因合成的方法获得目的片段
实验步骤:
(1) 通过基因合成,叠加PCR 获得目的片段,连接至PUC57 载体测序。
(2) 将测序后符合要求的基因或功能元件片段亚克隆至目的载体。
(3) PCR 及酶切鉴定,
(4) 对构建好的目的载体进行测序.
1.2 我们最终提供的实验结果
实验记录、测序结果、酶切位点图、电泳图、酶切图;
构建好的重组质粒与含该质粒的甘油菌。
1.3 我们保证:
实验报告、测序报告真实,可靠
本公司在保证质量的前提下,在最短的时间内完成实验。
本公司保证检测结果准确、客观、可信。
本公司将对所有技术服务相关材料信息保密,并会在服务完成后按客户要求对相关材料进行
合理处理。
1.4 服务说明:
获取目的基因所需的原材料若客户提供,则应该给予本公司基因克隆要求及相关的实验材料
(如质粒图谱,动物组织或细胞,基因信息等);并且客户应保证所提供原材料即基因模板
的正确性。如基因模板本身具有移码突变或其它无义碱基突变,由此造成的实验时间延误、
重复实验费用或其它经济损失均由客户承担。(从客户提供的基因模板获取目的基因,如重
复两次,均在相同位置出现相同突变,则认为是模板问题。)
若客户需要构建表达质粒载体,客户可以选择提供目的基因的PCR 产物、含有目的基因的质
粒、cDNA 克隆模板、目标蛋白的基因序列以及载体等资料(百奥迈科生物可免费提供常用载
体)。
如目的基因所在的载体由客户提供,则客户需要提供足量纯度高的质粒(>5ug,电泳图清晰,
达酶切测序要求)及本公司鉴定工作所需的材料。
本公司在收到客户提供的材料后在第二日开始鉴定工作,鉴定的时间不包括在实验周期。