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慢病毒与 RNAi(RNA干扰)
将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(PTGS)被称为RNA干扰。
服务类别:分子与细胞总访问:6580
最后更新:2024-5-17半年访问:42
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  • 服务介绍
  • 公司简介

简介:近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。通过构建RNAi表达载体制备shRNA(发卡结构小干扰RNA),已成为进行RNA干扰实验的常用手段之一。 而目前为了感染原代细胞和难感染的细胞系或者在动物水平进行RNAi,研究科学家更多的选择了慢病毒载体。由于慢病毒可以同时感染分裂和非分裂细胞、整合性以及免疫原性低等优点,目前在RNAi的研究中,基于慢病毒构建的shRNA被最广泛的使用。而在RNAi研究需要长期观察或者需要进行动物实验时,基于慢病毒构建的shRNA的优势更为明显。

 

基于载体的shRNA载体构建
  本中心提供利用自主开发的先进siRNA设计软件为客户提供RNAi设计和shRNA载体构建服务。中心还为客户提供包括shRNA质粒表达载体构建、shRNA病毒表达载体(包括可诱导系统)、RNAi阴性对照、RNAi阳性对照等。

基于载体的microRNA载体构建
   公司提供microRNA的构建服务,可以将客户研究的microRNA序列构建至质粒载体或者慢病毒载体。

RNA干扰慢病毒构建包装纯化

目前我们能够为您提供包括RNAi靶序列设计、慢病毒载体构建、测序、慢病毒生产等一站式服务。

服务流程:1、客户提供背景资料,我们共同探讨服务的可行性和技术路线。
2. 签订技术服务合同,商定服务收费、任务期限等,客户需要预付实验总费用的50%-70%作为实验预付款。  3. 实验结束,按合同内容交付结果。

 

 

实验流程:

 

1. shRNA表达载体的选用:客户可以根据实验的需要选用不同的慢病毒载体。
2. 设计RNAi靶序列: 
3. shRNA慢病毒载体构建:合成模板、双酶切shRNA空载体、连接与转化、测序鉴定、质粒制备及定量。 
4. 提供实验结果: 我们将提供包装纯化好的各靶点的慢病毒颗粒、测序结果、滴度检测结果和病毒构建包装纯化实验报告等。

 

 

 

 

收费标准和服务周期:

项目

时间

服务编号

定制型RNAi靶点慢病毒颗粒制备

 

 

1.定制型慢病毒转导颗粒:2×108 TU (滴度1×108-1×109TU/ml)

6个工作周

LVD-289

2.定制型慢病毒转导颗粒:5×108 TU (滴度1×108-1×109TU/ml)

6个工作周

LVD-589

3.定制型慢病毒转导颗粒:1×109 TU (滴度1×108-1×109TU/ml)

6个工作周

LVD-1089

RNAi全套服务

 

 

1.设计干扰靶点,通过实验验证靶点有效性,有效靶点慢病毒颗粒大批量制备2×108 TU (滴度1×108-1×109TU/ml)

14个工作周

LVR-289

2.设计干扰靶点,通过实验验证靶点有效性,有效靶点慢病毒颗粒大批量制备5×108 TU (滴度1×108-1×109TU/ml)

14个工作周

LVR-589

如有特殊需要请咨询公司技术部门。客户还可以委托我公司进行动物实验、细胞和动物水平各项功能学的检测。 如:QPCR,RT-PCR,流式,电镜,EMSA,Tunel,组化,MTT,WB,Elisa,IP等。

 

【本平台合作项目】

分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务!

【全国免费热线】:400-675-6758

【电话】 023-65316016,023-65316556

【邮箱】 china-western@163.com

【官网网址】www.cqwestern.com

【地址】 重庆高新区生物医药研发产业园D栋

 

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