蛋白表达
- 基因扩增
• 针对目的基因设计并合成引物。
• PCR扩增目的基因。
• 提供客户测序报告。
- 载体构建
• 将目的基因构建到载体质粒中。 将重组质粒DNA转化到感受态细胞中，诱导目的基因表达并选择高表达的菌株，通 过SDS-PAGE、Western Blot来评定小量诱导表达的结果，估计目的蛋白表达量，制定纯化策略。
- 重组蛋白表达
• 高表达细胞的大规模培养。
• 培养细胞收集并进行裂解。
- 蛋白纯化
• 亲和层析纯化目的蛋白，通过SDS-PAGE、Western Blot分析纯化蛋白。
• 最终产品形式为蛋白液或冻干粉，-20℃保存。
|
单项服务名称 |
时间 |
价格 | |
|
A |
引物设计、合成；PCR扩增目的基因 |
4-6天 |
面议 |
|
B |
重组载体构建、测序 |
1-2周 |
面议 |
|
C |
蛋白小量表达（SDS-PAGE检测、获得高表达菌株） |
3天-1周 |
面议 |
|
D |
发酵表达目标蛋白（1L发酵液） |
3天-1周 |
面议 |
|
E |
GST或HIS融合蛋白亲和纯化 |
1-2周 |
面议 |
|
F |
目的蛋白表达检测分析（包括SDS-PAGE、含量测定） |
3天-1周 |
面议 |
|
G |
蛋白Western Blot检测，ABGENT免费提供GST/HIS标签抗体用于检测。 |
1周 |
面议 |
|
H |
非融合蛋白及特殊纯化 |
面议 |
面议 |
