酵母双杂交

酵母双杂交系统是一种直接在真核细胞内检测蛋白相互作用的方法，具有灵敏度高和特异性好的优点。玉华公司提供多套酵母双杂交系统，
1.Clontech公司基于GAL4转录因子特性建立的一套系统，可用于检测多种蛋白-蛋白间的相互作用，是一种有效的检测方法。
2.Stratagene CytoTrap 双杂交系统可以称作是酵母细胞质双杂交系统，是在Ras 途径的基础上建立的，可对胞质蛋白、膜蛋白、转录因子、inhibitors作为bait蛋白进行酵母双杂交

一、客户提供材料

客户可提供载有诱饵基因的质粒；也可提供基因名称，登录号。

二、诱饵基因载体构建

1) 亚克隆

2) 将诱饵基因构建至BD载体中，测序确保无突变； 

3) 检测BD载体中诱饵蛋白的表达，SDS-PAGE电泳及Western-blot检测；检测诱饵蛋白是否有毒性；是否存在自激活现象。

三、文库筛选

1）使用公司具有的筛选文库，或者应客户要求购买文库（有时客户自己提供特制的文库），文库筛选，阳性克隆；

2）抽提质粒，共转化再次验证阳性克隆；

3）排除假阳性，对克隆进行测序及生物信息学分析。

上海玉华生命科技发展有限公司（http://www.yh-keji.com/main.asp ）

电话 021-65030614—208  汪博士 021-65030607   海伦

邮箱： shiyan@yh-keji.com

传真   021-65790714