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自噬性细胞死亡是一种非凋亡性程序性细胞死亡,它参与细胞对外界刺激发生反应,参与发育过程,并且有抗肿瘤、抗病菌和延长寿命的作用,与肌肉和神经变性疾病等病理过程
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原理
自噬性细胞死亡是一种非凋亡性程序性细胞死亡,它参与细胞对外界刺激发生反应,参与发育过程,并且有抗肿瘤、抗病菌和延长寿命的作用,与肌肉和神经变性疾病等病理过程
有关。在形态学上,即将发生自噬的细胞胞浆中出现大量游离的膜性结构,称为前自噬泡(Preautophagosome)。前自噬泡逐渐发展,成为由双层膜结构形成的空泡,其中包裹着变性坏死的细胞器和部分细胞浆,这种双层膜被称为自噬泡(Autophagosome)。LC3是自吞噬体上微管相关蛋白轻链3,我们构建并筛选获得了表达LC3-GFP融合蛋白的稳定细胞株,该细胞株可用来观察药物对细胞自噬的影响。
结果判断
LC3-GFP荧光亮点的数量、亮度及亮点面积与细胞自噬的发生及其程度呈正相关。如下图所示,class3 药物可诱导LC3-GFP的聚集。