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药物对人肿瘤细胞周期的影响
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1、流式细胞仪检测细胞周期
原理
细胞周期(cell cycle)是指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程,分为间期与分裂期(M期)两个阶段。间期又分为三期即DNA合成前期(G1期)、DNA
合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。用流式细胞仪检测细胞周期通常用PI染细胞核,PI在一定波长的光下发出荧光,其强度与DNA含量成正比。
结果判断
药物作用于HGC细胞24h后,细胞全部变圆,部分漂浮。收集细胞进行流式细胞仪检测,结果如图B显示,药物作用后,G1、S期细胞明显减少,G2期细胞明显增加,说明HGC细胞被阻断于G2-M期,药物影响了肿瘤细胞进行正常的有丝分裂。
2、体外Tubulin聚合实验
原理
该方法检测受试化合物是否通过抑制微管聚合来抑制细胞有丝分裂。微管聚合实验是通过测定光密度值,从而判断微管蛋白的聚合程度。聚合曲线代表微管蛋白聚合的三个不同阶段,依次为成核期、生长期和平台期。化合物通常调节微管聚合的一个或多个不同的阶段。