一、技术简介
miRNA是长片段RNA序列的一部分,短小的非编码的单链RNA,由大约70 nt大小的可形成发夹结构的前体加工而来,通过与目标mRNA的3'端非编码区域(3’-untranslated region,3’-UTR)互补。Northern blot分析的灵敏度低、通量差仍是其主要不足。实时定量PCR由于其灵敏度高、方便快速成为检测的一个不错选择。
由于成熟的miRNA仅为21-23 nt,不能通过传统方法进行发转录,进而进行定量。可设计反转录引物与成熟miRNA结合,形成反转录引物/成熟miRNA复合物,并在miRNA的5’末端延伸。这样就得到一个较长的反转录扩增因子,为进一步做实时定量PCR提供了符合要求的摸板。
二、实验流程
1. 提取样本中的RNA。
2. 反转录。
3. 荧光定量PCR。
三、服务说明及结果
1. 客户提供:检测样本(组织或细胞),或纯化好的RNA。
2. 公司提供:基本实验步骤、图片、分析结果。
3. 实验周期:10个工作日。
【欢迎来电/邮件咨询】
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