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蛋白质组label-free
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服务类别:分子与细胞总访问:1877
最后更新:2024-6-24半年访问:11
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                                    label-free案例

声明:案例为本公司实际操作案例。为保护客户的权益与保密协议,在保证实验结果真实有效的前提下,我们对实验的数据进行了适当的变动处理,欢迎用户来我公司参观及考证结果真实性。请勿转载!责任自负!


一、样品处理
1、8个样品冻干,加入TFA水溶液从溶。
2、取8个C18脱盐柱分别加入100%乙jing离心。再加入TFA 离心。
3、8个C18脱盐柱分别加入从溶的样品,离心1min反复上样3次。
4、分别加入洗脱液离心1min,并收集离心后的洗脱液冻干。
5、将冻干后样品加入A液从溶后离心2min,取上清定量。
6、分别取相同的量进行质谱检测

二、肽图质谱检测
检测条件
液相:EASY-nLC1200
色谱条件:色谱柱:Dionex C18 PePMap300, 1.9um, 120Å; ID 150um, length 12cm。
流速:略
洗脱条件:

time 0 8 24 60 79 80         85         86        90
%B 5 5 13 28 40 95         95         6           6


质谱仪:QE
质谱条件:数据采集时间:78min, 喷雾电压 (spray voltage):2.0KV; 毛细管温度(caplillary temperature):320℃; 碰撞能量(normalized collision energy):27%, 采集质量范围:300-1400 Da。


CK_TIC



CK__BPC


单个样品重复3次

比较组间有统计意义的差异蛋白。

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