细胞、细菌敲除技术服务

细胞内基因的定点敲除、敲入

2013年 1月份，美国两个实验室在《 Science》杂志发表了基于 CRISPR-Cas9技术在细胞系中进行基因敲除的新方法，该技术与以往的技术不同，是利用靶点特异性的 RNA将 Cas9核酸酶带到基因组上的具体靶点，从而对特定基因位点进行切割导致突变。具有效率高、速度快、生殖系转移能力强及简单经济的特点。

Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats（CRISPR）是细菌和古细菌为应对病毒和质粒

不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制，其中 II型 CRISPR/Cas免疫系统依赖 Cas9内切酶家族靶向和剪

切外源 DNA。在这一系统中， crRNA（CRISPR-derived RNA）通过碱基配对与 tracrRNA（trans-activating RNA）

结合形成双链 RNA，此 tracrRNA/crRNA二元复合体指导 Cas9蛋白在 crRNA引导序列靶定位点剪切双链

DNA，其中 Cas9的 HNH核酸酶结构域剪切互补链，其 RuvC-like结构域剪切非互补链。具体如下图所示：

基因敲除（敲入）流程：

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