iTRAQ

产品定义

iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）技术是由美国应用生物系统公司ABI研发的一种多肽体外标记技术。该技术采用4种或8种同位素的标签，通过特异性标记多肽的氨基基团，然后进行串联质谱分析，可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量。

技术原理

iTRAQ试剂由三部分组成：报告基团、质量平衡基团和肽反应标记试剂基团，形成4种或8种相对分子质量均等量（145或305）的异位标签。

iTRAQ试剂组成图（以4-plex为例）

iTRAQ试剂用于标记酶解后的肽段。在质谱图中，任何一种iTRAQ试剂标记的不同样本中的同一肽段表现为相同的质荷比。在串联质谱中，报告基团、质量平衡基团和多肽反应基团之间的键断裂，质量平衡基团丢失，带不同同位素标签的同一多肽产生不同的报告离子，根据报告离子的信号强度值可获得样品间相同肽段的定量信息，再经过软件处理得到蛋白质的定量信息。

实验流程

注释：“样品及实验预判”包括定量、SDS-PAGE测试、酶解和质谱分析，对样品质量及样品之间的平行性进行初步判断。

使用仪器

             Thermo Scientific Q Exactive                AB Sciex TripleTOF^TM 5600

技术优势

可同时对2-8种不同条件样品进行蛋白质差异分析。

适合广泛样品类型：胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等。

与凝胶分离的蛋白质定量技术相比，iTRAQ质谱定量技术可检测到更多类型的蛋白质分子，如低丰度蛋白质、强酸（碱）性蛋白质、<10KD或>100KD的蛋白质分子。

应用领域

疾病标志物筛选                              作用机制研究

植物抗逆研究                                 药物作用靶点研究

特殊功能蛋白质筛选

样品要求