吉凯基因提供RNAi全套产品服务,包括定制RNAi产品系列、Easy RNAi产品系列、RNAi全套产品等,具体有化学合成RNAi、质粒载体shRNA、慢病毒载体vshRNA、RNAi腺病毒产品等。
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RNAi全套产品服务
产品简介
当病毒基因、人工转入基因、转座子等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内,并利用宿主细胞进行转录时,宿主细胞常产生一些dsRNA。宿主细胞胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA(大约21~23 bp),即siRNA。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链,继之由反义siRNA再与体内一些酶(包括内切酶、外切酶、解旋酶等)结合形成RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC)。RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合,RISC具有核酸酶的功能,在结合部位切割mRNA,切割位点即是与siRNA中反义链互补结合的两端。被切割后的断裂mRNA随即降解,从而诱发宿主细胞针对这些mRNA的降解反应。在正常生物体内,RNA干扰起到抗病毒、抑制基因过量表达的作用。
产品组成
产品比较
比较项目 | 化学合成siRNA | DNA载体shRNA | Lentiviral-shRNA | Adenoviral-shRNA |
siRNA结构 | 双链RNA或发夹结构RNA | 发夹结构RNA | 发夹结构RNA | 发夹结构RNA |
RNA干扰持续时间 | <72小时 | <10天 | >30天 | ~10天 |
适合的细胞系 | 转染效率大于70%的细胞 | 转染效率大于20%但是可以传代的细胞 | 几乎所有细胞 | 几乎所有细胞 |
单次制备费用 | 低 | 中 | 较高 | 高 |
重复使用费用 | 中 | 低 | 低 | 低 |
是否可自行扩增 | 不可以 | 可以 | 不可以 | 不可以 |
瞬时干扰实验 | 转染效率大于70%的细胞 | 转染效率大于20%但是可以传代的细胞 | 几乎所有细胞 | 几乎所有细胞 |
构建稳定表达siRNA的细胞株 | 不满足 | 满足,但有风险 | 满足,可以同时制备多种稳定表达细胞系 | 不满足 |
组织特异性干扰实验 | 不满足 | 满足 | 满足 | 满足 |
可诱导RNA干扰实验 | 不满足 | 满足 | 满足 | 满足 |
基因沉默后示踪实验 | 不满足 | 满足 | 满足 | 满足 |
裸鼠荷瘤实验 | 低重复性 | 低重复性 | 高重复性 | 高重复性 |
干细胞分化实验 | 不满足 | 不满足 | 满足 | 不满足 |
转基因knockdown实验 | 不满足 | 不满足 | 满足 | 不满足 |
应用领域
后续服务
1. 多种同类功能试验对阳性基因的验证;
2. 多细胞的验证;
3. 过表达该基因的回复验证;
4. 体内试验的验证(动物模型);
5. 功能基因下游的筛选(敲减后细胞的芯片检测,Western Blot验证);
6. 下游基因操作工具的制备;
7. 病例样本的检测(组织芯片检测);
8. 基因芯片检测;
9. 蛋白质芯片检测;
参考文献
1. "Li M, Rossi JJ." Lentiviral Vector Delivery of siRNA and shRNA Encoding Genes into Cultured and Primary Hematopoietic Cells. Methods Mol Biol. 2005;309:261-72.
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8. Maurizio Federico, Lentivirus Gene Engineering Protocols (Methods in Molecular Biology) Humana Press; 1 edition, April 30, 2003
Tiscornia G, Singer O, Verma IM. Production and purification of lentiviral vectors.Nat Protoc. 2006;1(1):241-5.
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