细胞培养服务内容:
1.培养大量状态良好的细胞用于后续实验。
2.负责将客户所购买的细胞冻存保种与本实验室,实验完成后客户可以要求回寄细胞。
客户要求及实验周期
1.客户购买细胞邮寄与我们培养
客户必须提供状态良好的细胞我们才能够顺利快速地进行实验。因为在邮寄过程中细胞受温度与营养缺失等因素影响很大,收到细胞时很可能细胞已经全部死亡或已经污染,这样需要客户再次邮寄细胞,邮寄细胞在三次以内。
2.我们也可以为客户代为购买细胞并且提供冻存保种服务,客户需要随时邮寄。
3.如要培养的为具有确定目的基因的细胞株,需要提供其中相关目的基因的信息。收到细胞后我们也会及时检测目的基因表达情况,如果没有目的基因表达客户需要重新提供细胞,出现此情况实验推后我们不负相关责任。
4.客户邮寄细胞时需一并提供细胞培养条件及相关注意事项。
5.培养周期在3-7天(视细胞类型及生长情况而定)。
细胞转染服务内容:
技术服务:
磷酸钙转染
磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法,磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮作用进入靶细胞,被转染的DNA可以整合到靶细胞的染色体中从而产生有不同基因型和表型的稳定克隆。这种方法首先由Graham和van der Ebb使用,后由Wigler修改而成。可广泛用于转染许多不同类型的细胞,不但适用于短暂表达,也可生成稳定的转化产物。
该法不适用于原代细胞(所需的DNA浓度较高),操作简便但重复性差。在实验中使用的每种试剂都必须小心校准,保证质量,甚至偏离最优条件十分之一个pH都可能导致磷酸钙转染的失败。而且对于有些细胞不适用。
脂质体转染
脂质体为人工膜泡,可作为体内,体外物质转送载体。将需转移的DNA或RNA包裹于质脂体,由于质脂体具有磷脂双层与胞膜相似,因此,可与细胞膜融合,将DNA转入宿主细胞。
影响转染效率差异的主要原因是细胞系间个体的差异,有的细胞系细胞膜通透性较好,质脂体复合物较容易进入细胞,转染效率就高。又有的细胞系本生就不容易被转染。其次脂类与DNA形成易于转染结构的特性存在负面效应。其中主要的问题是毒性,表现为细胞聚集在一起,从壁上脱落。另为脂质体转染易于受到血清中的脂肪与脂蛋白以及细胞外基质中带店成分,如硫酸软骨素等干扰引起细胞死亡从而影响转染效率。
客户方需提供:
1.生长状况良好的宿主细胞株,一并提供细胞特性,培养条件及相关注意事项。
2.我们也可以为客户代为购买细胞并且提供冻存保种服务,客户需要随时邮寄。
3.提供质粒,并说明质粒大小,浓度,抗性,拷贝数等相关背景资料。
联系方式:021-35110780,13524859797,联系人:马经理 在线QQ;1010093685
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