SDS凝胶电泳常用试剂配制
SDS凝胶电泳常用试剂配制方法如下：
一、3×SDS-PAGE loading buffer的配制
3×SDS-PAGE loading buffer 10ml
1M Tris-Hcl (PH 6.8) 1.5ml
SDS 0.6g
BPB(溴酚蓝) 30mg
甘油（丙三醇） 3ml
去离子水 5.5ml
1、将除BPB以外的药品溶解。SDS常温下很难溶解，可以在37℃水浴溶解。溶解后，再加入BPB，进行溶解；
2、把溶好的buffer分装到1.5ml的离心管中，1ml/管，常温放置；
3、使用前，每管加入30µL巯基乙醇。
注意事项：巯基乙醇为危险品，加入的过程在通风橱中完成，并且带好手套。
二、10×PBS的配制
0.1M PBS（10×PBS） 1L
NaH2PO4.2H2O 2.83g
Nacl 85g
Na2HPO4.12H2O 28.98g
1、用去离子水将以上药品进行溶解；（溶解的非常慢，可能需要过夜）
2、调PH值到7.2，用0.4µm的滤膜过滤。常温保存；
3、工作时用的是1×PBS。
三、1.5M Tris-Hcl (PH 8.8) 的配制
1.5M Tris-Hcl 250ml
Tris 45.425g
1、用200ml去离子水将Tris溶解。
2、用浓盐酸调PH值到8.8。
3、调好PH的Tris-Hcl定容到250ml。
4、0.4µm的滤膜过滤，常温保存。
注意事项：Tris的缓冲能力很强，调PH值时，费些时间，但不要调过。
四、1M Tris-Hcl (PH 6.8) 的配制
1M Tris-Hcl 250ml
Tris 30.275g
1、用200ml去离子水将Tris溶解；
2、用浓盐酸调PH值到6.8；
3、调好PH的Tris-Hcl定容到250ml；
4、0.4µm的滤膜过滤，常温保存。
五、30%丙烯酰胺的配制
30%丙烯酰胺 250ml
丙烯酰胺 72.5 ml
BIS甲叉丙烯酰胺 2.5 ml
1、把药品用去离子水溶解后定容到250ml；
2、用滤纸过滤，放在棕色瓶子中，4℃保存。
注意事项：两种药品有毒性，配制过程要带手套和口罩。
六、10%SDS的配制
1．1g SDS加入10ml去离子水进行溶解；
2．分装到1.5ml离心管中，-20℃保存。
七、10%过硫酸铵的配制
1．1g 过硫酸铵加入10ml去离子水进行溶解。
2．分装到1.5ml离心管中，-20℃保存。
八、5×SDS-PAGE电泳缓冲液的配制
5×SDS-PAGE电泳缓冲液 1L
Tris 15.1g
Glycine（甘氨酸） 94g
SDS 5g
将以上药品用去离子水溶解后定容到1L，常温保存。工作时用的是1×SDS-PAGE电泳缓冲液。
九、考马斯亮蓝R-250染色液的配制
1、往1g考马斯亮蓝R-250中加入250ml异丙醇，在磁力搅拌器上搅拌六小时以上；
2、加入650ml去离子水，磁力搅拌器搅拌过夜；
3、再加入100ml冰醋酸进行溶解，磁力搅拌器搅拌；
4、在通风橱内用滤纸进行过滤。常温保存。染色液只能反复用两次。
注意事项：在磁力搅拌器上搅拌时，要把容器封口。
十、脱色液的配制
脱色液 1L
醋酸（冰乙酸） 100ml
乙醇（无水乙醇） 50ml
去离子水 850ml
常温保存。
一、3×SDS-PAGE loading buffer的配制
3×SDS-PAGE loading buffer 10ml
1M Tris-Hcl (PH 6.8) 1.5ml
SDS 0.6g
BPB(溴酚蓝) 30mg
甘油（丙三醇） 3ml
去离子水 5.5ml
1、将除BPB以外的药品溶解。SDS常温下很难溶解，可以在37℃水浴溶解。溶解后，再加入BPB，进行溶解；
2、把溶好的buffer分装到1.5ml的离心管中，1ml/管，常温放置；
3、使用前，每管加入30µL巯基乙醇。
注意事项：巯基乙醇为危险品，加入的过程在通风橱中完成，并且带好手套。
二、10×PBS的配制
0.1M PBS（10×PBS） 1L
NaH2PO4.2H2O 2.83g
Nacl 85g
Na2HPO4.12H2O 28.98g
1、用去离子水将以上药品进行溶解；（溶解的非常慢，可能需要过夜）
2、调PH值到7.2，用0.4µm的滤膜过滤。常温保存；
3、工作时用的是1×PBS。
三、1.5M Tris-Hcl (PH 8.8) 的配制
1.5M Tris-Hcl 250ml
Tris 45.425g
1、用200ml去离子水将Tris溶解。
2、用浓盐酸调PH值到8.8。
3、调好PH的Tris-Hcl定容到250ml。
4、0.4µm的滤膜过滤，常温保存。
注意事项：Tris的缓冲能力很强，调PH值时，费些时间，但不要调过。
四、1M Tris-Hcl (PH 6.8) 的配制
1M Tris-Hcl 250ml
Tris 30.275g
1、用200ml去离子水将Tris溶解；
2、用浓盐酸调PH值到6.8；
3、调好PH的Tris-Hcl定容到250ml；
4、0.4µm的滤膜过滤，常温保存。
五、30%丙烯酰胺的配制
30%丙烯酰胺 250ml
丙烯酰胺 72.5 ml
BIS甲叉丙烯酰胺 2.5 ml
1、把药品用去离子水溶解后定容到250ml；
2、用滤纸过滤，放在棕色瓶子中，4℃保存。
注意事项：两种药品有毒性，配制过程要带手套和口罩。
六、10%SDS的配制
1．1g SDS加入10ml去离子水进行溶解；
2．分装到1.5ml离心管中，-20℃保存。
七、10%过硫酸铵的配制
1．1g 过硫酸铵加入10ml去离子水进行溶解。
2．分装到1.5ml离心管中，-20℃保存。
八、5×SDS-PAGE电泳缓冲液的配制
5×SDS-PAGE电泳缓冲液 1L
Tris 15.1g
Glycine（甘氨酸） 94g
SDS 5g
将以上药品用去离子水溶解后定容到1L，常温保存。工作时用的是1×SDS-PAGE电泳缓冲液。
九、考马斯亮蓝R-250染色液的配制
1、往1g考马斯亮蓝R-250中加入250ml异丙醇，在磁力搅拌器上搅拌六小时以上；
2、加入650ml去离子水，磁力搅拌器搅拌过夜；
3、再加入100ml冰醋酸进行溶解，磁力搅拌器搅拌；
4、在通风橱内用滤纸进行过滤。常温保存。染色液只能反复用两次。
注意事项：在磁力搅拌器上搅拌时，要把容器封口。
十、脱色液的配制
脱色液 1L
醋酸（冰乙酸） 100ml
乙醇（无水乙醇） 50ml
去离子水 850ml
常温保存。
