活体成像在过量表达SoCYP85A1基因的应用

黑胫病是烟草生产中危害最大的病害之一。

近期，来自青岛农业大学的研究人员从菠菜中克隆了一个新的细胞色素抗性基因SoCYP85A1。该基因在烟草中的过表达显著增强了烟草对黑胫病的抗性，但不同转基因株系的抗性水平不同。

在转基因植株中检测到油菜素甾酮castasterone (CS) 的大量积累。而且，SoCYP85A1对转基因株系的抗氧化酶活性也有促进作用。此外，CS含量的变化导致植物内源激素稳态受到干扰。

研究结果表明，SoCYP85A1可以在转录水平通过调节防御酶的活性以及与植物内源激素的相互作用，参与烟草对黑胫病菌的防御反应。因此，SoCYP85A1可以作为提高烟草和其他经济作物对黑胫病抗性的潜在候选基因。

文章以题为: Overexpression of SoCYP85A1 Increase the Accumulation of Castasterone and Confers Enhanced Black Shank Tolerance in Tobacco Through Modulation of the Antioxidant Enzymes' Activites 于3月22日发表在frontiers in Plant Science上。

其中，SoCYP85A1被插入到pB7WG2D,1-GFP作为创建过表达的矢量，T4代转基因烟草通过PCR和Vilber公司的Newton 7.0 植物活体成像进行了双重验证。

FIGURE 1 | Molecular identification of transgenic tobacco lines. (A) PCR analysis of genomic DNA with specific primers for the ORF of SoCYP85A1. (B) GFP analysis of transgenic lines. (C) RT-PCR analysis of WT and different transgenic lines. M, Molecular marker; WT, Wild type; P, Plasmid; 1–8: transgenic lines.

Newton 7.0植物活体成像，除可用于转基因检测外，还可以用于微生物侵染，基因表达调控，植物抗逆性研究，突变体筛选，植物发育等相关研究。

主要特点：

1、-90℃深度制冷CCD相机，搭载f0.70超级镜头，针对Luc报告基因，具有极高的检测灵敏度；

2、GFP专用的激发光源和滤光片，有效地避免了叶绿素自发荧光的干扰；

3、双载物台设计，可Z轴升降，便于调整视野大小

4、盆栽专用载物台，可放置不同大小的样品盆，且可进行多角度旋转，避免了叶片之间的遮挡，获得更加理想的结果

5、可直接拍摄彩色图片，获得绿色植物原图，方便进行信号和明场图像的对比

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