肌酐 (Cr) 苦味酸法测定试剂盒使用说明书
肌酐 (Cr) 苦味酸法测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
分光光度法 50 管/48 样
注 意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
肌酐是在肌肉中从磷酸肌酸通过自发和不可逆转化而形成的，除非肌肉质量有大的变化，通常情况所形成的肌酐量是相当恒定的。游离肌酐的循环量完全依赖于它的排泄速度，从而测定尿液，血清或血浆中的肌酐量，可用于肾功能检查。肌酐含量的增高常见于:慢性肾衰竭时排泄量的减少及肢端肥大症。
测定原理：
肌酐与过量苦味酸在碱性条件下反应生成橙红色苦味酸肌酐。在波长 490 nm 处有最大吸收峰，在一定的时间内测定该复合物，即可计算出样本中肌酐的含量，并可避免干扰。
肌酐+碱性苦味酸————肌酐苦味酸复合物
自备仪器和用品：
可见分光光度计、普通离心机，超速离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1 瓶，4℃保存，临用前过滤。试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂三：10x 标准液×1 瓶，4℃保存，临用前，蒸馏时 10 倍稀释，终浓度为 0. 1 mg/ml。
*工作液：试剂二：试剂一 = 1：10, 临用前配置
样本收集：
1. 血清，血浆，血清或血浆中的肌酐在 2-8℃下可保存 24 小时。
2. 尿液:试验前将新鲜尿液用蒸馏水作 1/50 稀释，测定结果乘以 50。
测定操作：
1. 分光光度计预热 30 min，调节波长到 490 nm，蒸馏水调零。
2，按下表添加样本试剂，充分混匀，置 37℃水浴 30 秒钟后，选择波长 490nm，以空白管校零点读取起始吸光度(A1)，90 秒钟后读取终末吸光度(A2)
备注:可根据使用仪器的不同，恒比例改变试剂与样本的量。注意：空白管只需要做一次。
| 试剂名称（μL） | 样本管 | 空白管 | 标准管 |
| 样本 | 100 | ||
| 试剂三 1x | 100 | ||
| 蒸馏水 | 100 | ||
| 工作液 | 1000 | 1000 | 1000 |
计算公式：
样本管吸光度 A2 一样本管吸光度 Al
肌酐(umol/L)= X 标准液浓度
校准液吸光度 A2-校准液吸光度 A1样本管吸光度 A2 一样本管吸光度 Al
肌酐(umol/L)= X 标准液浓度
注意事项：
1 方法最低检出限为 2ug(即 0.04g/L)，方法定量下限 4ug(即 0.08g/L)，方法线性范围为 2ug~180ug(即0.04g/L~3.60g/L，以样品取样体积 50ul 计算)，方法批内精密度范围为 0.8%~4.6%(肌酐浓度为 0.4g/L~28g/L)，批间精密度范围为 20%~4.5%(肌酐浓度为 0.6g/L~3.9g/L)，方法加标回收率范围为 970%~102.3%(肌酐加标浓度为 0.4g/L~1.1g/L)。本法测定中的最小取样量为 50uL。
- 尿样中含有 01mgL 的镍、汞、硒、钒，0.2mg/L 的铬，0.3mg/L 的杀虫脒，0.4mg/L 的镉、对硝基酚，0.6mgL 的铅、砷，1mg/L 的马尿酸及甲基马尿酸，16mg/L 的 2-硫代噻唑烷-4-羧酸，2mg/L 的氟，3mg/L 的酚，100mg/L的三氯乙酸，400mg/的扁桃酸，1000mg/L 的苯乙醛酸，不干扰测定。
- 反应温度、苦味酸纯度及其浓度、氢氧化钠浓度均对测定值有影响。反应温度必须控制在 30℃以下。加水至 10mL 混匀后应尽快完成标准和样品的测定，从最先开始测定至最后一个样品结束，整个比色过程必须控制在 30min 内完成。
5 本产品在岛津-UV1601PC 型仪器上通过第三方检测，用于其他仪器需进行验证。
6 中华人民共和国卫生行业标准 尿中肌酐分光光度测定方法
（Urine-Determination of creatinine -Spectrophotometric method） WS/T 9 7 - 1 9 9 6
