木质素含量检测试剂盒微量检测方法
产品内容：
试剂一：液体 34mL×1 瓶，4℃保存。每次用完用封口膜密封保存。试剂二：液体 30mL×1 瓶，4℃保存。
微量法
微量法
标准品：粉剂×1 支，50mg 木质素，4℃保存。临用前加入 1mL 高氯酸，充分混匀溶解，配成50mg/mL 的标准液。
产品说明：
木质素是构成植物细胞壁的成分之一，具有使细胞相连的作用。木质素存在于木质组织中，主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁，为次生壁主要成分。
木质素中的酚羟基发生乙酰化后在 280nm 处有特征吸收峰，280nm 的吸光值高低与木质素含量正相关。
试验中所需的仪器和试剂：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、玻璃管、封口膜、高氯酸、冰乙酸和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品处理：
样品 80℃烘干至恒重，粉碎，过 40 目筛，称取约 3mg 于 1.5mLEP 管中。
二、测定步骤：
1、分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 280nm，冰乙酸调零。
2、操作表：在玻璃管中依次加入下列试剂：
产品说明：
木质素是构成植物细胞壁的成分之一，具有使细胞相连的作用。木质素存在于木质组织中，主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁，为次生壁主要成分。
木质素中的酚羟基发生乙酰化后在 280nm 处有特征吸收峰，280nm 的吸光值高低与木质素含量正相关。
试验中所需的仪器和试剂：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、玻璃管、封口膜、高氯酸、冰乙酸和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品处理：
样品 80℃烘干至恒重，粉碎，过 40 目筛，称取约 3mg 于 1.5mLEP 管中。
二、测定步骤：
1、分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 280nm，冰乙酸调零。
2、操作表：在玻璃管中依次加入下列试剂：
| 测定管 | 标准管 | 空白管 | |
| 样品（mg） | 3 | - | - |
| 试剂一（µL） | 300 | 300 | 300 |
| 高氯酸（µL） | 12 | - | 12 |
| 标准液（µL） | - | 12 | - |
| 封口膜密封，充分混匀。于 80℃水浴锅水浴 40min，进行乙酰化。每隔 10min 震荡一次， 然后自然冷却。 |
|||
| 试剂二（µL） | 300 | 300 | 300 |
| 充分混匀后于常温 8000g 离心 10min，取上清。 | |||
| 上清液（µL） | 12 | 12 | 12 |
| 冰乙酸（µL） | 588 | 588 | 588 |
| 测定 280nm 下的吸光值 A，记为 A 测定管、A 空白管、A 标准管，计算△A=A 测定管-A 空白管、△A 标准=A 标准管-A 空白管。 | |||
三、木质素含量计算：
C 标准=C 原液×V 标准÷V 乙酰化×V 上清÷V 检测=0.0196 mg/mL
木质素（mg/g）= △A÷（△A 标准÷C 标准）×V 检测÷（W×V 上清÷V 乙酰化）
= 0.5998×△A÷△A 标准÷W
木质素（mg/g）= △A÷（△A 标准÷C 标准）×V 检测÷（W×V 上清÷V 乙酰化）
= 0.5998×△A÷△A 标准÷W
C 标准：标准液在最终检测体系中的浓度，0.0196 mg/mL；C 原液：标准液浓度，50mg/mL；V 标准：加入的标准液的体积，0.012mL；V 乙酰化：乙酰化反应体积，0.612mL；V 上清：上清液体积，0.012mL；V 检测：检测反应总体积，0.6mL；W：样本质量，g。
